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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 电化学 » 电化学传感器 » 金电极表面滴加抗体溶液，冰箱4°过夜发现干了怎么办？？？
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onlycwt

铜虫 (小有名气)

[求助] 金电极表面滴加抗体溶液，冰箱4°过夜发现干了怎么办？？？

最近在做免疫传感器实验。使用的体系是：金电极-硫醇-抗体-抗原。

     我用的抗体浓度是0.5mg/ml，金电极表面滴加5ul在常温下放置半小时后放置冰箱4°C过夜。第二天我发现电极表面干了（也不是完全干，像一层粘的膜），但是从冰箱拿出来放置在常温中1分钟后表面又会变得湿润了。后续又滴加过20ul抗体溶液，过夜后也干了。
     像这样干了的情况，会不会影响抗体的活性，后续抗原接的上吗？电极表面抗体溶液的体积滴加多少微升比较好啊？一般抗体用什么浓度？可以直接放在常温下过夜吗（我在广州，现在室温23度）？

求助，多谢多谢！！
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莫听穿林打叶声，何妨吟啸且徐行。
1楼 2013-03-13 14:01:56
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Jackcd12

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
yanbo1986: 金币+2, 感谢应助。 2013-03-13 14:27:40
onlycwt: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-03-13 14:28:01
为避免水分的蒸发，你该把样品放置在一个特殊的密封的容器中，容器下面装一些缓冲溶液，上面放置你的样品，然后将容器密封盖好，再放冰箱。
  现在的情况，很难受说蛋白质是否变性没有，不过，也需要试一试，滴加少量缓冲液润湿样品后，假设没有变性进行你的下一步，如果结果不行。就重新开始，过夜保存按上述方式。
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Themoreamanlearns,themoreheknowshisignorance!
2楼2013-03-13 14:07:57
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onlycwt

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Jackcd12 at 2013-03-13 14:07:57
为避免水分的蒸发，你该把样品放置在一个特殊的密封的容器中，容器下面装一些缓冲溶液，上面放置你的样品，然后将容器密封盖好，再放冰箱。
  现在的情况，很难受说蛋白质是否变性没有，不过，也需要试一试，滴加少 ...

我是放大烧杯中，用保鲜膜密封了的，表面滴加了20uL也干了，但是常温下密闭容器中过夜是不会干的，不知道是不是冻干了
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莫听穿林打叶声，何妨吟啸且徐行。
3楼2013-03-13 14:27:54
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醋人

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
onlycwt: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-03-13 17:10:00
冰箱4°C冷藏，很有可能蒸发，可以把实验放在小烧杯中，再放入大烧杯，大烧杯添加1cm的水，保鲜膜密封
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精专业、强意志、壮身体
4楼2013-03-13 14:47:00
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Jackcd12

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by onlycwt at 2013-03-13 14:27:54
我是放大烧杯中，用保鲜膜密封了的，表面滴加了20uL也干了，但是常温下密闭容器中过夜是不会干的，不知道是不是冻干了...

变干的原因是水分蒸发，样品在有水溶液的密闭中，水的蒸气压相同，这时样品不会变干的。如果需要放置较长时间后再用的话，最好放冰箱。
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Themoreamanlearns,themoreheknowshisignorance!
5楼2013-03-13 14:54:33
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onlycwt

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 醋人 at 2013-03-13 14:47:00
冰箱4°C冷藏，很有可能蒸发，可以把实验放在小烧杯中，再放入大烧杯，大烧杯添加1cm的水，保鲜膜密封

我试试看，谢谢谢！另外，抗体在冰箱溶液没有干的情况下放置10小时会不会失活？
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莫听穿林打叶声，何妨吟啸且徐行。
6楼2013-03-13 17:10:53
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醋人

至尊木虫 (职业作家)
引用回帖:
6楼: Originally posted by onlycwt at 2013-03-13 17:10:53
我试试看，谢谢谢！另外，抗体在冰箱溶液没有干的情况下放置10小时会不会失活？...

这就不清楚了，自己看吧
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精专业、强意志、壮身体
7楼2013-03-13 17:15:57
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