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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 蛋白表达分子量偏大
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qiannv04

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

楼主过表达的质粒上是否带有融合标签？如果有的话试着检测一下标签看看
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21楼2013-03-16 22:02:03
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-06-10 13:14:34
你用质谱测定一下样品蛋白质的分子量，这应该是准确的。SDS-PAGE有时与胶或者蛋白质的形状有关，有时候测定的不太准确。
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22楼2013-06-09 23:13:23
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欧阳-90

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-03-13 00:21:10
SDS-PAGE确定的分子量不是很准确的，有些蛋白的疏水性强，等电点高，在胶上跑得慢也不足为奇。只要确定表达的蛋白正确就可以了。

可是SDS过量，不是保证了蛋白质在电泳时泳动速度只和蛋白的大小有关，而和蛋白原本的等电点无关了吗？
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23楼2013-06-14 23:16:19
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
23楼: Originally posted by 欧阳-90 at 2013-06-14 23:16:19
可是SDS过量，不是保证了蛋白质在电泳时泳动速度只和蛋白的大小有关，而和蛋白原本的等电点无关了吗？...

这时候理论上的。实际上经SDS上样buffer处理后，蛋白不完全是球形，带电荷的多少也不完全相同，所以有时候迁移率与分子量的关系与理论计算出来的不完全吻合。
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24楼2013-06-15 00:00:35
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jixiaoman12

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by Phyrce at 2013-03-13 17:29:13
楼主你倒是说说目标蛋白的大小啊。 目标蛋白5KD偏大5KD ，跟目标蛋白50KD偏大5KD，那不是一个概念啊。
SDS-PAGE是不太准确，不过50KD的话，就太夸张了吧- -
而且SDS-PAGE根据的就是蛋白分子量大小，蛋白被负电荷包 ...

你好 想向您请教一下有关蛋白质分子量的问题。我看到有文献说蛋白质中7S的分子量在180000-210000Da之间，11S分子量在302000-375000Da，从两一篇文献中（蛋白酶水解大豆分离蛋白的分子水平表征）看到凝胶电泳图显示7S的分子量大小大于11S，我有点糊涂了，两者到底哪个分子量大，希望大侠不吝赐教
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25楼2014-08-23 10:48:17
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zhuzhuwinner

禁虫 (初入文坛)
本帖内容被屏蔽
26楼2021-07-16 15:28:25
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