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1988bobo

新虫 (小有名气)

[求助] 求助ACE抑制活性的测定方法指导,越细致越好

刚入手ACE抑制的实验,不知怎么开始。
我的ACE0.1u的和0.25u的,请问测定的时候怎么稀释呢?稀释是解冻之后还是直接把水注入试剂小瓶中?5mmol 马尿酰组氨酸亮氨酸怎么配制呢?中间还有很多疑问,希望能有好心人,咱们私下联系一下交流,多谢了!这是我参照的方法
本试验采取体外检测法,取100μLHHL(5mmol/L)和40μL水解物混合于37℃下保温3min后,加入ACE(0.03mgACE与600μL去离子水混合)10μL,混匀后于37℃下保温30min,再加入250μL的1mol/L HCl,终止反应,再加入1.7mL的乙酸乙酯经15s振荡后,以10000r/min离心10min,吸取1.0mL的乙酸乙酯层,放入85℃烘箱干燥1h,加入3mL去离子水,混匀后于228nm下测定吸光值。对照组除了不加抑制剂,空白组除在反应前后加入0.2mL 1mol/L HCl外,其余操作与反应管相同。
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雪卡yu

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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1988bobo: 金币+30, ★★★★★最佳答案, 希望交流。qq562823654 2013-03-29 12:00:30
HHL、ACE、样品都是要用硼酸缓冲液配制的吧,应该不是去离子水。
个人认为用HPLC比比色法更方便容易些,很多文献上都有方法介绍的。
我也是刚接触,很多也不懂,希望能互相交流
2楼2013-03-28 16:01:46
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