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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 晶体 » 文献解析 » 关于蛋白结晶的问题
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wst258

金虫 (小有名气)

[交流] 关于蛋白结晶的问题

我现在准备做重组蛋白的结晶，请问
1  纯化多少蛋白就够做结晶
2  我的蛋白上带有六个his标签，作结构测定是不要去掉tag。
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1楼 2007-08-28 16:22:43
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wst258

金虫 (小有名气)
没有人来帮我的忙吗?
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2楼2007-08-29 15:47:18
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coreldraw11

铜虫 (小有名气)
1到2毫克就可以开始了，当然蛋白质多多亦善，试的结晶条件越多，得到晶体的可能性也越大

His tag对结构解析影响不大，但很可能影响结晶过程。能切就切，不能切就算了，带his tag而结晶的蛋白也很多。
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3楼2007-08-30 05:37:49
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zhongdianshi

银虫 (小有名气)
我们一般筛200个条件，每个条件1个微升，有200多微升。通常蛋白浓度在10mg/ml以上，有2mg差不多。
his通常不影响结构。
引用回帖:
Originally posted by wst258 at 2007-8-28 04:22 PM:
我现在准备做重组蛋白的结晶，请问
1  纯化多少蛋白就够做结晶
2  我的蛋白上带有六个his标签，作结构测定是不要去掉tag。

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4楼2007-09-08 03:47:50
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wst258

金虫 (小有名气)
zhongdianshi 你好.能不能把你的做结晶的筛选条件还有方法给我传一点,我的邮箱wst258@163.com
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5楼2007-09-08 12:04:05
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