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yulingzhu

木虫 (正式写手)

[求助] 求助蛋白质酶解成肽的实验方法

大家好!现我想将牛血清白蛋白用胰蛋白酶水解成多肽,看文献蛋白质与酶投的比例都不同,请问这个比例应该如何选择。胰蛋白酶酶解后的多肽分子量在多大范围?我参考文献方法0.4g BSA与30mg在pH8.5 20mM的硼酸缓冲液中水浴37度反应12h.结果用截留分子量为10K的超滤离心管离心后,分别将滤液和被截留的两部分溶液冻干,结果发现水解后所得产物大部分还是分子量大于10K的,而小于10k的不多,现在都不知道是水解后所得多肽主要还是分子量为大于10K的还是酶解没完成。请做过或熟悉过程的友友帮忙分析和指导下,非常感谢!本人第一次做这个,不太了解
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充实每一天
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87115wh

木虫 (小有名气)

七吃喀嚓

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
amisking: 金币+2, 鼓励积极发帖帮助解答问题。 2013-03-09 18:29:11
你水解牛蛋白的目的是什么呢?如果后期是要拿来进行质朴检测的,直接上机实验才能知道,要不也不能确定你是否水解完全啊
老妹,你说这是为什么呢
2楼2013-03-09 17:57:45
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yulingzhu

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 87115wh at 2013-03-09 17:57:45
你水解牛蛋白的目的是什么呢?如果后期是要拿来进行质朴检测的,直接上机实验才能知道,要不也不能确定你是否水解完全啊

我是要得到一定分子量范围的多肽,比如在1000-6000范围的
充实每一天
3楼2013-03-09 20:38:00
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