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求助蛋白质酶解成肽的实验方法
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| 大家好!现我想将牛血清白蛋白用胰蛋白酶水解成多肽,看文献蛋白质与酶投的比例都不同,请问这个比例应该如何选择。胰蛋白酶酶解后的多肽分子量在多大范围?我参考文献方法0.4g BSA与30mg在pH8.5 20mM的硼酸缓冲液中水浴37度反应12h.结果用截留分子量为10K的超滤离心管离心后,分别将滤液和被截留的两部分溶液冻干,结果发现水解后所得产物大部分还是分子量大于10K的,而小于10k的不多,现在都不知道是水解后所得多肽主要还是分子量为大于10K的还是酶解没完成。请做过或熟悉过程的友友帮忙分析和指导下,非常感谢!本人第一次做这个,不太了解 |
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