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散步者high

新虫 (小有名气)

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[求助] 卵母细胞提取物诱导体细胞所发生的表观遗传修饰的研究

老板想做这方面的东西，自己是新人，挺愁的不知重何下手，但又想做点东西出来，望各位前辈给点建议···

1.老板给了篇文章《Epigenetic reprogramming in somatic cells induced by
extract from germinal vesicle stage pig oocytes》，是在DEVELOPMENT AND STEM CELLS上的，韩国人做的（见附件）。文章的大致结构:a.准备成纤维细胞核和卵母细胞 b.对成纤维细胞进行通透处理，卵母细胞进行去卵丘细胞、去透明带和去核处理。 c. 用剩下的卵母细胞细胞质提取物对成纤维细胞进行诱导，检查发生重编程细胞的各种指标，如：形态  干性基因的表达  H3K9甲基化水平 d 接下来就是用诱导出的细胞，做各种实验  如通过SCNT技术，构建出重组胚胎，研究胚胎的各种表观遗传指标。  e  同时作者也构建了一种表达oct4-EGFP的成纤维细胞系，将其做为源头细胞，进行诱导分化，然后构建重组胚胎，与d中的重组胚胎做比较。 f  还将细胞移植到了MII 期的卵母细胞内，还涉及到了免疫组化···  总之这篇文章做的挺多的，挺全面的

现在就是想问下  各位前辈  卵母细胞提取物诱导的大体趋势是什么意义又何在  自己能找到什么创新点  能做什么样的有意义工作？  最近想把大致的protocol 写出来，发给老板看看

还想问下表观遗传学在细胞和胚胎方面各在的大致趋势,或是一些公认牛人认为的大体趋势是什么？？？  又有什么意义···
望各位前辈  各位师兄师姐  给点建议··· 不胜感激

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