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散步者high

新虫 (小有名气)

[求助] 卵母细胞提取物诱导体细胞 所发生的 表观遗传修饰的研究

老板想做这方面的东西,自己是新人,挺愁的不知重何下手,但又想做点东西出来,望各位前辈给点建议···

1.老板给了篇文章《Epigenetic reprogramming in somatic cells induced by
extract from germinal vesicle stage pig oocytes》,是在DEVELOPMENT AND STEM CELLS上的,韩国人做的(见附件)。文章的大致结构:a.准备成纤维细胞核和卵母细胞 b.对成纤维细胞进行通透处理,卵母细胞进行去卵丘细胞、去透明带和去核处理。 c. 用剩下的卵母细胞细胞质提取物对成纤维细胞进行诱导,检查发生重编程细胞的各种指标,如:形态  干性基因的表达  H3K9甲基化水平   d 接下来就是用诱导出的细胞,做各种实验  如通过SCNT技术,构建出重组胚胎,研究胚胎的各种表观遗传指标。  e  同时作者也构建了一种表达oct4-EGFP的成纤维细胞系,将其做为源头细胞,进行诱导分化,然后构建重组胚胎,与d中的重组胚胎做比较。 f  还将细胞 移植到了MII 期的卵母细胞内, 还涉及到了免疫组化···  总之这篇文章做的挺多的,挺全面的

现在就是想问下  各位前辈  卵母细胞提取物诱导的大体趋势是什么   意义又何在  自己能找到什么创新点  能做什么样的有意义工作 ?  最近想把大致的protocol 写出来,发给老板看看

还想问下 表观遗传学 在细胞 和胚胎方面 各在的大致趋势,或是一些公认牛人认为的大体趋势是什么???  又有什么意义···
望各位前辈  各位师兄师姐  给点建议···   不胜感激
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老六,好样的···
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