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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 青霉菌产不产纤维素酶？
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Andyllk

银虫 (小有名气)

[求助] 青霉菌产不产纤维素酶？

我们做课题是分离纯化青霉，然后测产物酶活；但是我们用划线和稀释涂布总是染菌，特别是细菌，请问青霉菌产不产纤维素酶，我想把培养基改下，改成有纤维素的培养基，使细菌无法生长然后分离出青霉。可行不？怎样选择培养基？
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1楼 2013-03-06 22:00:50
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Andyllk

银虫 (小有名气)
我是lz
我们是从发霉的橙子表面上分离的青霉，开始老师让试管划线，长了大概一个星期，大部分都污染了，只有两管看着还像青霉，但是有好几管不像青霉，因为孢子绿得发黑，到时候我会上传照片，请高手指点一下。
现在橙子已经腐烂长虫不能用了，仅剩的两管也不是很纯，试管口还有黏黏的细菌。我们不知道下一步应该如何做 ，请有经验的学长学姐指教...
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2楼2013-03-07 09:47:22
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lancxl

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
有没有试过在纯化用的平板培养基里添加氯霉素
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3楼2013-03-07 14:54:54
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Andyllk

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by lancxl at 2013-03-07 14:54:54
有没有试过在纯化用的平板培养基里添加氯霉素

准备试试，请问氯霉素溶液怎么配制？每个平板加多少量呢？

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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4楼2013-03-07 16:51:54
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我曾经广泛采集样品筛选淀粉酶，长霉的橘子是有细菌的，你如果刮取表面的孢子来稀释涂布就能得到真菌的单菌落，划线是不严谨的分离方法。
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
5楼2013-03-07 23:01:46
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sunqu

捐助贵宾 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我觉得橘子发霉是要产酒精的，那么这种霉应该是不怕少量的酒精的，其他细菌就怕了，不知道我想的对不对，等大神
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加油
6楼2013-03-07 23:46:39
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Andyllk

银虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2013-03-07 23:01:46
我曾经广泛采集样品筛选淀粉酶，长霉的橘子是有细菌的，你如果刮取表面的孢子来稀释涂布就能得到真菌的单菌落，划线是不严谨的分离方法。

学习了，我打算涂布和划线都做，看哪个效果好

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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7楼2013-03-08 00:18:18
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molecula

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
建议你做区系分析。
所谓的区系分析，包括两个方面，一个是系列稀释法，把可能存在目的菌的混合菌稀释到10000倍以上，然后涂布，挑取单菌落；
另外一个方面是，将单菌落划线，反复传代3次，随后，纯化后的菌落测序，根据ITS序列或者16S rDNA序列比对，鉴定种属关系。
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8楼2013-03-09 08:58:04
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war3one

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

青霉是产纤维素酶的,国内做纤维素酶做的最好的山东大学的代表菌种就是斜卧青霉,可以加抗生素去除细菌,因为抗生素是杀不死丝状真菌的,然后划线在PDA培养基,一天后在倒置显微镜下观察,用手术刀把菌丝切下转移到新的PDA培养基中达到分离的目的
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9楼2013-05-07 23:23:46
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秀才ecust

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

青霉菌的分离加氨卞青霉素去除细菌,一般的真菌都抗青霉素,直接用刀片把它切下来就可以了，保证无菌。
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10楼2013-05-20 17:02:18
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