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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 超滤更换buffer时损失非常大
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haniel01

铜虫 (初入文坛)
送鲜花一朵
引用回帖:
10楼: Originally posted by gaojuan1985 at 2013-03-06 16:27:34
我一般都用4L的大烧杯，呵呵。透析液用个3-4L，不过也看你的液体体积多大呀

这么大啊~我一般也就5ml左右的体系500ml差不多够了吧？
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11楼2013-03-06 21:29:03
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greenygreen

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by gaojuan1985 at 2013-03-06 14:01:44
所以很多时候，我宁可通过透析来换缓冲液，几乎没啥损失。要是非得用超滤的话，你最后是倒过来低速离心下来的？还是不倒过来，直接吸取上面的液体的？那种可以倒过来低速离心取得最终样品的还好一些。

能说说您透析的步骤么？我换缓冲液的时候要是透析都会沉淀的很厉害。。。比如我的纯化后的蛋白含有至少200mM的咪唑，要是换成无咪唑的缓冲液，需要梯度透析么？还有就是蛋白需要稀释么？至少要稀释到什么程度？浓度。
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12楼2013-03-06 22:13:08
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子非鱼ys

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
12楼: Originally posted by greenygreen at 2013-03-06 22:13:08
能说说您透析的步骤么？我换缓冲液的时候要是透析都会沉淀的很厉害。。。比如我的纯化后的蛋白含有至少200mM的咪唑，要是换成无咪唑的缓冲液，需要梯度透析么？还有就是蛋白需要稀释么？至少要稀释到什么程度？浓度 ...

楼主问题解决了么？我现在问题跟你的差不多，求助
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13楼2015-10-13 16:22:15
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Abxdb

禁虫
本帖内容被屏蔽
14楼2023-05-17 23:56:26
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