24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
查看: 432  |  回复: 1

jinqimaggie

铁虫 (小有名气)

[求助] 求助,如何验证我设计的primer是否可以做出帖子中的目标miRNA?谢谢!!!!!

我有两个primer, 目标miRNA序列在最下边,我想知道怎么样能查出我的primer设计得对不对,是否能做出我的目标miRNA
Ps:没有template,只是用两个Primer从两端做,中间有重叠,
谢谢!
5’ hsa-pre-miR21+ T7 promoter
gaaatTAATACGACTCACTATAGG TGTCGGGTAGCTTATCAGACTGATGTTGACTGTTGAATCTCATGGC
3’ hsa-pre-miR21
TGTCAGACAGCCCATCGACTGGTGTTGCCATGAGATTCAACAGTCAAC                        


>hsa-mir-21 MI0000077
UGUCGGGUAGCUUAUCAGACUGAUGUUGACUGUUGAAUCUCAUGGCAACACCAGUCGAUGGGCUGUCUGACA
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lhs521521

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你是要扩增precursor-miR-21吧,我不知道你这是怎么设计的,不过我们一般的做法是设计个逆转录引物(这个设计方法与mature-miR-21一致),然后再设计上下游real-time引物:下游引物与mature-miR-21一致,上游需要与precursor原序列的5‘端相一致(大概20多个碱基)!
寻找真正的自我!
2楼2013-03-06 08:23:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 jinqimaggie 的主题更新
信息提示
请填处理意见