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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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ann花开花落

铜虫 (正式写手)

[求助] PCR

为何PCR产物的3‘末端会是A?
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supingan

新虫 (初入文坛)

便于克隆后连T载体
2楼2013-03-05 17:13:09
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

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【答案】应助回帖

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感谢参与,应助指数 +1
ann花开花落: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-03-06 12:35:06
这是Taq DNA聚合酶的一种特性,因为Taq酶缺乏3’-》5‘的外切核酸酶活性,但不只是仅在PCR产物末端的3‘ 加A,Taq酶的特性是在dATP, dGTP, dCTP, dTTP多种碱基都存在的情况下,优先将A加到3’的末端。假如反应体系里面只有dTTP而没有其他三种碱基,Taq酶也会将T加到3‘末端,有些T载体就是这么制备的。

高保真酶比如Pfu等扩增的PCR片段都是平末端的,因为他们都3’-->5‘的外切酶活力
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
3楼2013-03-05 19:08:06
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