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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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nickey910

木虫之王 (职业作家)

[求助] 怎样保证离体大鼠脑组织中ATP不被分解?

各位战友,有谁做过脑缺血再灌注试验,离体脑组织中ATP的液相含量测定,怎样保证离体大鼠脑组织中ATP不被分解,现在我用的样品处理方法是取0.3g脑组织,立即用0.5mol/L高氯酸溶液2ml在冰水浴充分匀浆静置10min,0~4℃以3000rpm离心10min,取上清加入0.5mol/L氢氧化钾调ph为6.5,再以10000rpm离心10min,取上清进样走液相。液相色谱条件为色谱柱Hypersil ODS C18  250mm*4.6mm,柱温40℃,检测波长254nm,流动相A:70mmol/L磷酸二氢钠+3mmol/L四丁基溴化铵(调ph6.5),流动相B:甲醇。A:B=90:10,流速1ml/min。
现在的问题是对照品出峰顺序为AMP 7.3min,ADP  14.4min,ATP  27.2min,分离效果挺好,但是样品中的ADP和ATP检测不出来,基线就是平的,很郁闷,不知是哪里出了问题,是ATP分解了吗,还是别的原因,请帮忙分析一下,非常感谢
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chenyawei

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
amisking: 金币+2, 鼓励发帖交流! 2013-03-05 20:21:48
nickey910: 金币+1, ★★★很有帮助 2013-03-12 08:37:13
是不是含量太低了啊,杂质影响也比较大,还有损失,我想做发酵细胞的ATP检测,还在考虑呢,254的波长很多东西都有吸收的
2楼2013-03-05 19:48:29
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nickey910

木虫之王 (职业作家)

请教高人
3楼2013-03-06 09:41:55
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nickey910

木虫之王 (职业作家)

请教高人
4楼2013-03-08 07:55:47
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nickey910

木虫之王 (职业作家)

求高人
5楼2013-03-11 11:18:34
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nickey910

木虫之王 (职业作家)

请教高人
6楼2013-03-12 08:36:43
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nickey910

木虫之王 (职业作家)

请教高人
7楼2013-03-13 13:52:40
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nickey910

木虫之王 (职业作家)

请高人解答
8楼2013-03-15 12:46:16
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nickey910

木虫之王 (职业作家)

求高人解答
9楼2013-03-18 09:06:17
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nickey910

木虫之王 (职业作家)

取消求助
10楼2013-09-30 12:09:49
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