10楼: Originally posted by 无为书生 at 2013-03-27 15:45:20
如果用pMD18，插入或没插入会有相应的蓝白斑，看不到蓝白斑我认为是你的pMD18很可能根本就没有转到菌里面，至于单菌落可能是污染的有氨苄抗性的杂菌，没有做，只是小推断。...

9楼: Originally posted by cdl007 at 2013-03-27 13:33:34
没有目的条带，显然是没有转化进去
没有蓝白斑比较可疑，实际上应该说都是白斑，没有蓝斑吧？板子放4℃容易显蓝斑
如果你pcr出来，没有蓝斑，可能是x-gal出问题了
但是你pcr都没出来，那就重做连接，加大目的片 ...

11楼: Originally posted by 生物生物 at 2013-03-27 20:56:48
您说：“pMD18很可能根本就没有转到菌里面”我是42度热激45秒，1分钟也试过，如果转不进去，会是哪里出了问题，怎么判断与改进呢？谢谢...