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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 麻烦大神给解释下这句话
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wqj1988926

金虫 (正式写手)

[求助] 麻烦大神给解释下这句话

The pellet was resuspended in 10
ml of resuspension buffer (10 mM Mes-Tris (pH 7.5),
250 mM sucrose, 5% glycerol (v/v), 1 mM EDTA, 1 mM
DTT, 0.1 mM PMSF),layered on a 25/50% sucrose step
gradient made up in gradient buffer (5 mM Mes-Tris
(pH 7.5), 1 mM EDTA, 1 mM DTT and 0.1 mM
PMSF).
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风雪夜归人
1楼 2013-02-28 20:55:40
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Lester11

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
wqj1988926: 金币+1, ★有帮助 2013-03-01 08:35:31
沉淀物用10ml的Buffer重悬，括号内是Buffer的成分，然后层析，层析的浓度梯度由25%和50%的蔗糖在梯度Buffer中形成，括号中是梯度Buffer的成分。
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Followyourheart!
2楼2013-02-28 21:37:58
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wqj1988926

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Lester11 at 2013-02-28 21:37:58
沉淀物用10ml的Buffer重悬，括号内是Buffer的成分，然后层析，层析的浓度梯度由25%和50%的蔗糖在梯度Buffer中形成，括号中是梯度Buffer的成分。

我这个应该是不连续的蔗糖密度梯度离心，什么是层析，我应该怎么做？
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风雪夜归人
3楼2013-02-28 22:02:54
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wizardfan

至尊木虫 (著名写手)

优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wqj1988926: 金币+1, ★有帮助 2013-03-01 08:36:00
wqj1988926: 金币+2, ★有帮助 2013-03-01 08:37:34
用10毫升悬浮液（配方10 mM Mes-Tris (pH 7.5),
250 mM sucrose, 5% glycerol (v/v), 1 mM EDTA, 1 mM
DTT, 0.1 mM PMSF）把小球悬浮起来，然后倒在25%/50%的蔗糖梯度上

没有上下文，不知道具体是什么，离心还是过滤，但是就那段文字来说，就是这样理解的。
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4楼2013-03-01 01:36:18
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wqj1988926

金虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by wizardfan at 2013-03-01 01:36:18
用10毫升悬浮液（配方10 mM Mes-Tris (pH 7.5),
250 mM sucrose, 5% glycerol (v/v), 1 mM EDTA, 1 mM
DTT, 0.1 mM PMSF）把小球悬浮起来，然后倒在25%/50%的蔗糖梯度上

没有上下文，不知道具体是什么，离心还 ...

那这个25%/50%的蔗糖梯度溶液是怎么配制的呢，谢谢了
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风雪夜归人
5楼2013-03-01 08:34:04
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wqj1988926

金虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by wizardfan at 2013-03-01 01:36:18
用10毫升悬浮液（配方10 mM Mes-Tris (pH 7.5),
250 mM sucrose, 5% glycerol (v/v), 1 mM EDTA, 1 mM
DTT, 0.1 mM PMSF）把小球悬浮起来，然后倒在25%/50%的蔗糖梯度上

没有上下文，不知道具体是什么，离心还 ...

这个我是做密度梯度离心的，就是将悬浮液加在这个25%/50%的蔗糖梯度溶液在上就行吗
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风雪夜归人
6楼2013-03-01 08:37:25
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