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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 【求助】分析→→制备的转换
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jerckychang

新虫 (初入文坛)

[求助] 【求助】分析→→制备的转换

求助于各位老师。
没做过制备。现要制备一个杂质，破坏后无增加，仅有0.7%.
分析柱 250mm*4.6mm 5μ
制备柱150mm*21.2mm 5μ
均为C18柱。
问题1：
分析时的流速为1ml/min.根据分析到制备的一个转换公式，计算得出制备流速为20ml/min。但是这流速是不是太大了？另外，因为为一个梯度洗脱，流速增大，梯度程序需要变化吗？

问题2：
实在不知道应该把制备进样浓度和进样量设成多大。
分析时是1.5mg/ml.进样量10μl.

恳请各位老师提出各种建议啊~跪谢了。
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1楼 2013-02-27 13:50:06
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郭贝贝

木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by kkbyb at 2013-03-04 21:59:06
您做的这个是半制备吧？...

是，半制备C-18柱。
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5楼2013-03-04 22:19:44
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kkbyb

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
古可ぷ: 金币+1, 谢谢交流 2013-03-03 10:20:25
jerckychang: 金币+1, ★有帮助 2013-03-13 09:54:07
先从理论上说，柱长变化，梯度肯定需要变化。
从先辈经验说，不建议制备使用梯度，这个平衡很耗费溶剂。一般制备都是1-2mL进样，浓度可以达到几百毫克，不怕平顶峰
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2楼2013-02-28 22:15:28
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郭贝贝

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
古可ぷ: 金币+1, 谢谢交流 2013-03-03 10:20:43
首先20ml/min，应该已经超出仪器范围了，仪器一般是0~5ml/min。我们以前做制备时用的是4ml/min。上样量先用1ml试试，看看柱压以及分出的峰形如何，需要物质的峰有没有和其他杂质峰有重叠，然后再做调整。
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3楼2013-03-03 09:59:34
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kkbyb

木虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 郭贝贝 at 2013-03-03 09:59:34
首先20ml/min，应该已经超出仪器范围了，仪器一般是0~5ml/min。我们以前做制备时用的是4ml/min。上样量先用1ml试试，看看柱压以及分出的峰形如何，需要物质的峰有没有和其他杂质峰有重叠，然后再做调整。

您做的这个是半制备吧？
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4楼2013-03-04 21:59:06
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