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jerckychang

新虫 (初入文坛)

[求助] 【求助】分析→→制备的转换

求助于各位老师。
没做过制备。现要制备一个杂质,破坏后无增加,仅有0.7%.
分析柱 250mm*4.6mm 5μ
制备柱150mm*21.2mm 5μ
均为C18柱。
问题1:
分析时的流速为1ml/min.根据分析到制备的一个转换公式,计算得出制备流速为20ml/min。但是这流速是不是太大了?另外,因为为一个梯度洗脱,流速增大,梯度程序需要变化吗?

问题2:
实在不知道应该把制备进样浓度和进样量设成多大。
分析时是1.5mg/ml.进样量10μl.

恳请各位老师提出各种建议啊~跪谢了。
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kkbyb

木虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 郭贝贝 at 2013-03-03 09:59:34
首先20ml/min,应该已经超出仪器范围了,仪器一般是0~5ml/min。我们以前做制备时用的是4ml/min。上样量先用1ml试试,看看柱压以及分出的峰形如何,需要物质的峰有没有和其他杂质峰有重叠,然后再做调整。

您做的这个是半制备吧?
4楼2013-03-04 21:59:06
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kkbyb

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
古可ぷ: 金币+1, 谢谢交流 2013-03-03 10:20:25
jerckychang: 金币+1, 有帮助 2013-03-13 09:54:07
先从理论上说,柱长变化,梯度肯定需要变化。
从先辈经验说,不建议制备使用梯度,这个平衡很耗费溶剂。一般制备都是1-2mL进样,浓度可以达到几百毫克,不怕平顶峰
2楼2013-02-28 22:15:28
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郭贝贝

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


古可ぷ: 金币+1, 谢谢交流 2013-03-03 10:20:43
首先20ml/min,应该已经超出仪器范围了,仪器一般是0~5ml/min。我们以前做制备时用的是4ml/min。上样量先用1ml试试,看看柱压以及分出的峰形如何,需要物质的峰有没有和其他杂质峰有重叠,然后再做调整。
3楼2013-03-03 09:59:34
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郭贝贝

木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by kkbyb at 2013-03-04 21:59:06
您做的这个是半制备吧?...

是,半制备C-18柱。
5楼2013-03-04 22:19:44
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