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woerjianbo木虫 (小有名气)
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[求助]
想通过SPDP连接蛋白质和多肽，加入DTT会破坏蛋白质本身的二硫键吗
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| 有没有方法可以避免 |
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【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+3, 谢谢分享经验 2013-03-02 09:16:23
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wizardfan: 金币+3, 谢谢分享经验 2013-03-02 09:16:23
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SPDP实际上一般用于酶和蛋白之间的偶联，首先与两者之中的一个的伯氨基反应。之后将另外一个巯基化，然后将SPDP活化的物质用还原剂（如TCEP）还原出巯基，再与巯基化的另外一个物质反应，生成二硫键。这样就得到了偶联物。 蛋白和多肽的偶联你可以不用这种偶联剂。建议选用MBS或者SMCC或者Sulfo-SMCC。这样只需要多肽末端含有巯基就可以。当然如果多肽上不含有巯基，你可以在合成多肽的时候自己在末端添加。或者是根据多肽序列上含有的伯氨基或者羧基个数，来选用其他的偶联方法，如EDC或者GA法。 |
8楼2013-03-01 12:43:37
xiaoqi5992
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2楼2013-02-27 08:40:44
woerjianbo
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3楼2013-02-27 09:37:25
xiaoqi5992
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4楼2013-02-27 11:02:10