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赵建雪

银虫 (正式写手)

[求助] 这几个方法的公式是什么,急求

略做改动,将 10 个果的果皮切碎充分混合,取 0.5 g 鲜样放入 10 ml 1%
HCl 甲醇溶液室温黑暗中浸提 2h。用分光光度计测定提取液在 553 nm 和
600 nm 处的吸光值,二者之差即为花青苷的相对含量。差值每增加 0.01
定义为一个单位 U。设 3~5 次取样重复。单位u/g.FW
PAL 活性测定:取 0.5ml 酶液加入 2.5ml 的反应液 [硼酸缓冲液
(pH8.8),0.01M 苯丙氨酸],在 34oC 反应 30min 后用 0.5ml 35%(W/V)
的三氯乙酸终止反应,在 5,000g 离心 5min 除去变性的蛋白质。反应生成
的肉桂酸含量用在 290nm 处的吸光值来表示。每分钟光密度变化 0.001 所
需的酶量为 1 单位。对照实验用不加苯丙氨酸的反应液代替正常的反应液
进行。单位同上
CHI 活性测定: 2’,4,4,6’-四氢苯基苯乙烯酮的合成由柚皮素加
入 50% KOH 后酸化,然后用乙醇进行重结晶备用。取 0.75ml 的酶提液加
入 2ml 下列混合液[50mM Tris-HCl,pH7.4,牛血清蛋白 7.5mg/ml,50mM
KCN],然后加 50μl 1mg/ml 的查尔酮溶液,在 34oC 水浴 30min,另取同
量的酶提液沸水浴 10min 为对照,测定在 381nm 波长处的吸光值的变化
来表示 CHI 的酶活性。每分钟光密度变化 0.001 所需的酶量为 1 单位。单位同上。
此外有没有测ANS活性的方法
自己的路只有自己能负责
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舞动-青春

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
赵建雪: 金币+5, 博学EPI+1, ★★★很有帮助 2013-04-09 21:40:11
引用回帖:
10楼: Originally posted by 赵建雪 at 2013-04-08 19:10:40
先按要求配好的话,再混合那样缓冲液的物质量浓度都变了,并且各物质混合的量是多少也不确定呀...

先配母液,例如5ML提取液需要5*0.05mol抗坏血酸,你可以配制0.5mol/L的母液,这样取0.5ML母液就可以了,其他的与这个方法一样,最后用蒸馏水或者溶液定容到5ML
11楼2013-04-09 15:52:48
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舞动-青春

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

版主只测这2个酶?
2楼2013-04-01 12:38:27
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赵建雪

银虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 舞动-青春 at 2013-04-01 12:38:27
版主只测这2个酶?

本来测四个,但CHI的KCN没法卖,所以现在打算测PAL,DFR,UFGH,问一句知道测ANS/LDOX,CHS的方法吗
自己的路只有自己能负责
3楼2013-04-02 12:20:55
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赵建雪

银虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 舞动-青春 at 2013-04-02 15:53:06
有文献说亚硫酸氢钠可以代替氰化钾,效果也很好。后面的酶我也没找到方法,你哪个学校的呀?

烟台大学的
自己的路只有自己能负责
5楼2013-04-07 11:16:12
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