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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 请问miRNA靶基因验证时怎么突变靶基因的3‘UTR结合位点
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mlyhhh

木虫 (小有名气)

[求助] 请问miRNA靶基因验证时怎么突变靶基因的3‘UTR结合位点

例如：靶基因和miRNA的结合位点序列为：CAUUUCA，那应该怎么突变，不知道是突变其中一个还是几个碱基。看文献有的只突变1个碱基，有的突变2个碱基，不知道有没有什么原则。
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1楼 2013-02-26 14:11:11
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

lhs521521

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
mlyhhh: 金币+10, ★有帮助, 谢谢了 2013-02-28 08:53:27
我是把中间的5个突变的，引物突变法！
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寻找真正的自我！
6楼2013-02-27 15:50:17
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普通回帖

yaodadewo

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
mlyhhh: 金币+10, ★有帮助 2013-02-27 09:41:24
我是全突变，这样保险一些，最近刚做的，突变的话，就把C变成T或A，不要突变为互补的
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2楼2013-02-26 16:50:32
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mlyhhh

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yaodadewo at 2013-02-26 16:50:32
我是全突变，这样保险一些，最近刚做的，突变的话，就把C变成T或A，不要突变为互补的

我还打算做缺失突变，全突变不就跟缺失突变没啥区别了嘛。
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3楼2013-02-26 19:29:05
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

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【答案】应助回帖

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感谢参与，应助指数 +1
mlyhhh: 金币+10, ★有帮助, 多谢 2013-02-28 08:52:46
引用回帖:
3楼: Originally posted by mlyhhh at 2013-02-26 19:29:05
我还打算做缺失突变，全突变不就跟缺失突变没啥区别了嘛。...

只要在seed sequence里面突变1-2个碱基就可以了，你可以参考相关文献，做microRNA的文献非常多
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学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
4楼2013-02-27 11:08:36
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yaodadewo

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我们之前实验室有师姐做缺失，效果和突变一样，如果你不放心你可以做缺失
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5楼2013-02-27 14:04:39
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zhlf1989513

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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感谢参与，应助指数 +1
mlyhhh: 金币+20, ★★★很有帮助, 多谢了 2013-02-28 08:53:13
这个我们一般全突变，缺失做不做无所谓了，想做也可以，但是就像楼上说的缺失和全突变没什么本质的区别。所以这个我觉得无所谓。
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keepon
7楼2013-02-27 20:21:28
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zhangxn

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by lhs521521 at 2013-02-27 15:50:17
我是把中间的5个突变的，引物突变法！

请问你是怎么把中间的五个碱基突变的？有没有protocol 可以发给我看看吗？谢谢！我的邮箱：xiaona0379@163.com
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8楼2013-11-27 16:35:04
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lhs521521

新虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by zhangxn at 2013-11-27 16:35:04
请问你是怎么把中间的五个碱基突变的？有没有protocol 可以发给我看看吗？谢谢！我的邮箱：xiaona0379@163.com...

引物突变法，通过设计引物直接把要突变的碱基换成其他碱基，而其他的该互补的互补，该相同的相同！
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寻找真正的自我！
9楼2013-11-29 09:53:18
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忽然之间1104

新虫 (初入文坛)
就这样随便突变吗？没有一个突变的原则吗
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10楼2016-01-07 22:19:29
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