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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 大家帮我看看质粒肿木了？
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mascotte

金虫 (正式写手)
质粒提取之后跑胶有时可以看见三条带，分别是线性化，环状和超螺旋状态的质粒。提取的质粒质量好时，线性化的质粒少，大多以超螺旋的形式存在，此种形态的质粒在胶上目测的分子量要小于质粒的实际分子量。如3000bp大小的质粒，看起来只有2800的样子。对超螺旋的质粒进行单酶切，使之线性化再跑胶就可以看到质粒的实际大小。质粒冻融过后，超螺旋的质粒所占的比例会减少，环状和线性化的程度会增加。结合你所说的情况，第一道应该是超螺旋状态的质粒，第二道上面的条带是单酶切后线性化的质粒，下面是酶切不完全的超螺旋。第三道是冻融后的情况，超螺旋减少，环状和线性化程度增加。第四道是酶切过后，完全线性化（上）的质粒和剩余的酶切不完全的超螺旋（下）质粒。
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11楼2013-02-28 11:08:28
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