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金虫 (正式写手)

质粒提取之后跑胶有时可以看见三条带,分别是线性化,环状和超螺旋状态的质粒。提取的质粒质量好时,线性化的质粒少,大多以超螺旋的形式存在,此种形态的质粒在胶上目测的分子量要小于质粒的实际分子量。如3000bp大小的质粒,看起来只有2800的样子。对超螺旋的质粒进行单酶切,使之线性化再跑胶就可以看到质粒的实际大小。质粒冻融过后,超螺旋的质粒所占的比例会减少,环状和线性化的程度会增加。结合你所说的情况,第一道应该是超螺旋状态的质粒,第二道上面的条带是单酶切后线性化的质粒,下面是酶切不完全的超螺旋。第三道是冻融后的情况,超螺旋减少,环状和线性化程度增加。第四道是酶切过后,完全线性化(上)的质粒和剩余的酶切不完全的超螺旋(下)质粒。
11楼2013-02-28 11:08:28
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