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hxuhao

金虫 (小有名气)

[求助] 求高人指点。PBS做溶剂的stock放在DMSO里颜色就改变了。什么原因!

我的一种试剂是在PBS缓冲液里储存的。想拿出来用DMSO稀释测吸收光谱,储存液是绿色的。当溶在DMSO里就变成红色了,吸收光谱也变了。用PBS稀释仍旧是绿色。请问大家遇到过这种问题没?谁知道是什么原因!感谢高人指点!
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hxuhao

金虫 (小有名气)

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2楼: Originally posted by chaijudi at 2013-02-16 11:36:23
溶液的极性变化,引起吸收光谱变化,这种现象也是常有的!

你好,想问一下,这里极性变化主要是指pH的改变吧?我测了一下pH值改变还不算大。有没有可能是在DMSO中聚集或其他原因。
4楼2013-02-23 03:48:00
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hxuhao

金虫 (小有名气)

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3楼: Originally posted by sandi at 2013-02-16 12:24:18
通常溶剂极性改变会引起光谱变化
另外dmso有较强亲核性氧化性,不知你的样品在dmso中是否惰性

DMSO应该是非常惰性的啊。当我把变成红色的液体再次溶回PBS溶液,颜色也会变回来。而且将红色溶液在冰箱里冷冻后,冷冻固体变成绿色,再次解冻成液体又变成红色。
5楼2013-02-23 03:50:20
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hxuhao

金虫 (小有名气)

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2楼: Originally posted by chaijudi at 2013-02-16 11:36:23
溶液的极性变化,引起吸收光谱变化,这种现象也是常有的!

这是我用的物质的化学式,请帮忙看看是不是会和DMSO发生什么反应啊。

regent.jpg

6楼2013-02-23 03:56:51
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金虫 (小有名气)

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8楼: Originally posted by sandi at 2013-02-23 12:00:27
这样的染料在dmso里稳定。
极性不是酸碱性。
颜色从红到绿,说明吸收光谱红移了好多,估计是dmso溶剂化作用强,稳定了染料激发态,降低了激发态的能量,使得吸收红移。

非常感谢,但是是溶液在PBS里是绿色的,加到大量DMSO里变成了红色。我测了一下变色前和变色后的光谱,变色钱溶液是绿色,吸收峰在660nm,变色后是红色吸收峰蓝移,在532nm。所以和DMSo溶剂化作用相反,所以貌似无法这样解释。除非是增强了,可这又说不过去。我贴出了这种染料的化学式,麻烦帮忙看一下,是不是这种化学结构会引起什么特别的变化,非常感谢!
9楼2013-02-24 08:19:19
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金虫 (小有名气)

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7楼: Originally posted by chaijudi at 2013-02-23 09:29:08
溶液状态下,化学反应发生的可能性极小

我也知道肯定不是引起了化学反应。因为它颜色在冷冻时还会变回来,我想是不是类似于酚酞等酸碱指示剂,颜色会随pH值变化。但是DMSO这种东西本身就没有pH值的啊。按理也应该不是pH变化引起的啊。所以想到能不能是引起了物质的聚集,就是成为了几个分子的聚集体,这样增加了激发态的能量,所以吸收峰蓝移了(颜色由绿变红了)。不知道这个推断是否正确,烦请赐教。非常感谢!
10楼2013-02-24 08:25:02
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金虫 (小有名气)

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12楼: Originally posted by chaijudi at 2013-02-24 20:14:14
吸收光谱的移动和溶剂效益有关,决定于吸收谱带的类型,属于n-配还是配-配的,由于溶剂极性的变化,二者的吸收谱带变化是相反的。

感谢您的回复,但是如果是极性变化的话。我把我用的试剂的固体溶在DMSO里吸收峰是668,溶在Tritonx里是660,颜色变化都不太明显。只有当把固体溶在PBS后再加入大量的DMSO里颜色才会从绿色变成红色。所以我想要是极性变化的话,为什么完全溶在DMSO里时不会产生变化,而只有在先溶解在PBS里后再用DMSO稀释会发生这种现象。我还试过把我用试剂的固体溶在水里,然后用大量DMSO稀释。结果会是由绿变红,只是没有那么明显。同时,按DMSO于PBS为7:3的比例溶解试剂时,即PBS的量比较大时也不会变红。我想能否帮忙看一下我的试剂的化学式,是不是这种结构的有机物,本身有什么特殊的性质。非常感谢!
13楼2013-02-25 23:44:50
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金虫 (小有名气)

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11楼: Originally posted by sandi at 2013-02-24 08:31:26
haha不好意思,颜色变化看反了,你这个估计不是聚集体导致,吸收蓝移通常得H聚集体,没那么容易
你这个还是溶剂极性导致的,你试试乙醇或者甲醇看看就知道了,这两个溶剂应该介于水和dmso之间
这种染料通常是分子 ...

感谢您的回复,但是如果是极性变化的话。我把我用的试剂的固体溶在DMSO里吸收峰是668,溶在Tritonx里是660,颜色变化都不太明显。只有当把固体溶在PBS后再加入大量的DMSO里颜色才会从绿色变成红色。所以我想要是极性变化的话,为什么完全溶在DMSO里时不会产生变化,而只有在先溶解在PBS里后再用DMSO稀释会发生这种现象。我还试过把我用试剂的固体溶在水里,然后用大量DMSO稀释。结果会是由绿变红,只是没有那么明显。同时,按DMSO于PBS为7:3的比例溶解试剂时,即PBS的量比较大时也不会变红。我想能否帮忙看一下我的试剂的化学式,是不是这种结构的有机物,本身有什么特殊的性质。非常感谢!
14楼2013-02-25 23:45:37
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hxuhao

金虫 (小有名气)

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15楼: Originally posted by chaijudi at 2013-02-25 20:15:19
你的分子结构是?

属于尼罗蓝A类衍生物。不知道是否这样的化学结构有什么特别性质。

regent.jpg

16楼2013-02-27 02:28:28
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