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hxuhao

金虫 (小有名气)

[求助] 求高人指点。PBS做溶剂的stock放在DMSO里颜色就改变了。什么原因!

我的一种试剂是在PBS缓冲液里储存的。想拿出来用DMSO稀释测吸收光谱,储存液是绿色的。当溶在DMSO里就变成红色了,吸收光谱也变了。用PBS稀释仍旧是绿色。请问大家遇到过这种问题没?谁知道是什么原因!感谢高人指点!
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chaijudi

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

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hxuhao: 金币+50, ★★★★★最佳答案, 非常感谢。 2013-02-28 00:03:49
吸收谱的变化可能与质子在那三个氮原子间的迁移有关
随着溶液极性的不同,溶液中不同氮原子所表现的碱性也不同,被质子化的氮原子(个数)也不尽相同。
而且你起初是缓冲溶液,随着稀释,pH会变化(一方面来自于稀释效应,一方面来自于溶剂极性变化,磷酸盐的电离常数变化)
当用你的燃料直接与DMSO溶解,非质子溶剂,自然不会引起质子化氮原子数量的变化,颜色变化不大。
17楼2013-02-27 07:07:32
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普通回帖

chaijudi

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


crity328: 金币+1, 专家辛苦,欢迎常来~~新年快乐~ 2013-02-16 12:59:14
溶液的极性变化,引起吸收光谱变化,这种现象也是常有的!
2楼2013-02-16 11:36:23
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sandi

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖


crity328: 金币+1, 感谢交流,欢迎常来~新年快乐! 2013-02-16 12:59:29
通常溶剂极性改变会引起光谱变化
另外dmso有较强亲核性氧化性,不知你的样品在dmso中是否惰性
3楼2013-02-16 12:24:18
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hxuhao

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by chaijudi at 2013-02-16 11:36:23
溶液的极性变化,引起吸收光谱变化,这种现象也是常有的!

你好,想问一下,这里极性变化主要是指pH的改变吧?我测了一下pH值改变还不算大。有没有可能是在DMSO中聚集或其他原因。
4楼2013-02-23 03:48:00
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hxuhao

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by sandi at 2013-02-16 12:24:18
通常溶剂极性改变会引起光谱变化
另外dmso有较强亲核性氧化性,不知你的样品在dmso中是否惰性

DMSO应该是非常惰性的啊。当我把变成红色的液体再次溶回PBS溶液,颜色也会变回来。而且将红色溶液在冰箱里冷冻后,冷冻固体变成绿色,再次解冻成液体又变成红色。
5楼2013-02-23 03:50:20
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hxuhao

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by chaijudi at 2013-02-16 11:36:23
溶液的极性变化,引起吸收光谱变化,这种现象也是常有的!

这是我用的物质的化学式,请帮忙看看是不是会和DMSO发生什么反应啊。

regent.jpg

6楼2013-02-23 03:56:51
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chaijudi

至尊木虫 (著名写手)

溶液状态下,化学反应发生的可能性极小
7楼2013-02-23 09:29:08
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sandi

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖


crity328: 金币+1, 感谢交流,欢迎常来~ 2013-02-23 14:19:55
这样的染料在dmso里稳定。
极性不是酸碱性。
颜色从红到绿,说明吸收光谱红移了好多,估计是dmso溶剂化作用强,稳定了染料激发态,降低了激发态的能量,使得吸收红移。
8楼2013-02-23 12:00:27
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hxuhao

金虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by sandi at 2013-02-23 12:00:27
这样的染料在dmso里稳定。
极性不是酸碱性。
颜色从红到绿,说明吸收光谱红移了好多,估计是dmso溶剂化作用强,稳定了染料激发态,降低了激发态的能量,使得吸收红移。

非常感谢,但是是溶液在PBS里是绿色的,加到大量DMSO里变成了红色。我测了一下变色前和变色后的光谱,变色钱溶液是绿色,吸收峰在660nm,变色后是红色吸收峰蓝移,在532nm。所以和DMSo溶剂化作用相反,所以貌似无法这样解释。除非是增强了,可这又说不过去。我贴出了这种染料的化学式,麻烦帮忙看一下,是不是这种化学结构会引起什么特别的变化,非常感谢!
9楼2013-02-24 08:19:19
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hxuhao

金虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by chaijudi at 2013-02-23 09:29:08
溶液状态下,化学反应发生的可能性极小

我也知道肯定不是引起了化学反应。因为它颜色在冷冻时还会变回来,我想是不是类似于酚酞等酸碱指示剂,颜色会随pH值变化。但是DMSO这种东西本身就没有pH值的啊。按理也应该不是pH变化引起的啊。所以想到能不能是引起了物质的聚集,就是成为了几个分子的聚集体,这样增加了激发态的能量,所以吸收峰蓝移了(颜色由绿变红了)。不知道这个推断是否正确,烦请赐教。非常感谢!
10楼2013-02-24 08:25:02
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