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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 3RACE问题
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guxinhan123

银虫 (正式写手)

[求助] 3RACE问题

使用clontech的试剂盒做RACE，5·一次性成功，3·做了几次都没有结果，换过RNA重新反转录也换了因为还是不行。第一次pcr条带模糊，有的有几条带，巢式之后有主带，切胶回收不是目的基因，请大家帮忙分析下，谢谢了
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1楼 2013-02-07 12:59:16
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mlanqiang

木虫之王 (文学泰斗)

蓝博士

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
3‘段引物特异性应该不是很强。
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蓝精灵
3楼2013-02-07 13:59:13
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小木虫刘树青

木虫 (著名写手)

夜未眠

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
是不是3‘段引物特异性不强啊
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世界上只有一种真正的英雄主义，那就是看清生活的真相之后，依然热爱生活。
2楼2013-02-07 13:11:45
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robustli

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
have you ever try different annealing temperature, or using their touch down protocol?
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immunologyparasite
4楼2013-02-08 00:53:39
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通缉要饭

金虫 (著名写手)
先换别的酶试试，之前遇到过跑不出来的，后来换了高保真酶就跑出来。或者你重新设计下引物，我一般一次会设计好几条引物的，节约时间
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5楼2013-02-08 12:59:21
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