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zd_seu

金虫 (小有名气)

[求助] 薄膜法制备温敏脂质体,使用钙黄绿素作为药物模型,但是包封率很低,释放也不符合

如题,现在用DPPC和CHOL混合,制备温度敏感的脂质体,采用的是薄膜水化法,水化液是calcein(100mM) in PBS(10mM),使用的是高速离心(15000rpm,40min)重复三次,去除游离的钙黄绿素。
然后分别在4摄氏度和41摄氏度下,进行释放。
现有问题如下:
1.钙黄绿素的包封率很低;
2.做出来的结果是:4摄氏度的释放量反而略大于41摄氏度的释放量(重复几次都是这样);而且用曲拉通破膜后,整体的荧光有一定的下降,趋势很明显。

我们组只有我一个人在做脂质体,所以来到这里,希望知道的人,给我指点一下迷津。我初步怀疑是钙黄绿素没有包封进去,或者说包封率太低,试过一次逆向蒸发法,效果不是很好。是不是挤膜之后会好一点?一直没有挤膜过,而且用探头超声减小粒径,是否对其包封率也有影响。

我还尝试过将钙黄绿素的量减为0.1mM,然后不去除游离的钙黄绿素,而是加入氯化钴淬灭游离的钙黄绿素荧光,在测试释放的时候,也是利用这个原理,但是做出来也没有温度相应特性。

如果是没有包进去,可能是哪一步出现的问题;如果是包封率太低,应该怎么提高钙黄绿素的包封率?

大家都来帮帮我吧,愁死了,每次开会都被老板骂的要死,求解救啊!
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1196782296

新虫 (小有名气)

处境相同啊 我现在做的也啥啥都不是 完全自己瞎摸索
所谓呜呜呜
4楼2015-05-06 09:25:04
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查看全部 8 个回答

筱包子

金虫 (初入文坛)

你的脂质体做出来的么?我过来学哈经验,我的脂质体也是释放很低。药物是基本包进了的.
天道酬勤。
3楼2013-11-28 09:43:46
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gyx1993

新虫 (初入文坛)

你好,看到你之前发的这个帖子,你最后问题解决了吗?我也准备做温敏脂质体,看到你之前说的这些问题感觉不太好做啊,我能加你好友吗?
5楼2015-05-31 18:00:17
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aa1020

新虫 (初入文坛)

楼楼还用小木虫么,我也在自己摸索脂质体,老板让我用钙黄绿素检验脂质体是否包封成功,求指教
6楼2017-10-11 22:04:36
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