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zd_seu金虫 (小有名气)
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[求助]
薄膜法制备温敏脂质体，使用钙黄绿素作为药物模型，但是包封率很低，释放也不符合
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如题，现在用DPPC和CHOL混合，制备温度敏感的脂质体，采用的是薄膜水化法，水化液是calcein(100mM) in PBS(10mM)，使用的是高速离心（15000rpm,40min）重复三次，去除游离的钙黄绿素。 然后分别在4摄氏度和41摄氏度下，进行释放。 现有问题如下： 1.钙黄绿素的包封率很低； 2.做出来的结果是：4摄氏度的释放量反而略大于41摄氏度的释放量（重复几次都是这样）；而且用曲拉通破膜后，整体的荧光有一定的下降，趋势很明显。 我们组只有我一个人在做脂质体，所以来到这里，希望知道的人，给我指点一下迷津。我初步怀疑是钙黄绿素没有包封进去，或者说包封率太低，试过一次逆向蒸发法，效果不是很好。是不是挤膜之后会好一点？一直没有挤膜过，而且用探头超声减小粒径，是否对其包封率也有影响。 我还尝试过将钙黄绿素的量减为0.1mM，然后不去除游离的钙黄绿素，而是加入氯化钴淬灭游离的钙黄绿素荧光，在测试释放的时候，也是利用这个原理，但是做出来也没有温度相应特性。 如果是没有包进去，可能是哪一步出现的问题；如果是包封率太低，应该怎么提高钙黄绿素的包封率？ 大家都来帮帮我吧，愁死了，每次开会都被老板骂的要死，求解救啊！ |
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3楼2013-11-28 09:43:46
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新虫 (小有名气)
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