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zd_seu金虫 (小有名气)
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薄膜法制备温敏脂质体,使用钙黄绿素作为药物模型,但是包封率很低,释放也不符合
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如题,现在用DPPC和CHOL混合,制备温度敏感的脂质体,采用的是薄膜水化法,水化液是calcein(100mM) in PBS(10mM),使用的是高速离心(15000rpm,40min)重复三次,去除游离的钙黄绿素。 然后分别在4摄氏度和41摄氏度下,进行释放。 现有问题如下: 1.钙黄绿素的包封率很低; 2.做出来的结果是:4摄氏度的释放量反而略大于41摄氏度的释放量(重复几次都是这样);而且用曲拉通破膜后,整体的荧光有一定的下降,趋势很明显。 我们组只有我一个人在做脂质体,所以来到这里,希望知道的人,给我指点一下迷津。我初步怀疑是钙黄绿素没有包封进去,或者说包封率太低,试过一次逆向蒸发法,效果不是很好。是不是挤膜之后会好一点?一直没有挤膜过,而且用探头超声减小粒径,是否对其包封率也有影响。 我还尝试过将钙黄绿素的量减为0.1mM,然后不去除游离的钙黄绿素,而是加入氯化钴淬灭游离的钙黄绿素荧光,在测试释放的时候,也是利用这个原理,但是做出来也没有温度相应特性。 如果是没有包进去,可能是哪一步出现的问题;如果是包封率太低,应该怎么提高钙黄绿素的包封率? 大家都来帮帮我吧,愁死了,每次开会都被老板骂的要死,求解救啊! |

3楼2013-11-28 09:43:46
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新虫 (小有名气)
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