24小时热门版块排行榜    

查看: 420  |  回复: 2

枯藤老树216

新虫 (初入文坛)

[求助] RecA蛋白的PCR及蛋白的表达

刚刚接触分子实验,想请教一下RecA蛋白的基因如何在我的菌株中PCR扩增出来(我的菌株里不一定有但是同属里面有),扩增出来之后想验证一下这种蛋白在我的菌株受到外界压力时是否会过量表达?这个实验我该如何下手呢?
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mizhoulong

木虫 (著名写手)

环境卫生、微生物学

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+3, 鼓励交流! 2013-02-01 15:17:40
基因的事儿好说,pubmed上找到这个菌株的RecA基因,然后根据这个序列设计引物,进行扩增,可以用普通PCR定性,荧光定量PCR定量。

至于蛋白,自己做的少,只做过用蛋白的抗体进行免疫学检测,或者2D电泳后进行MALDI-TOF-MS检测。
环境卫生、微生物学、卫生应急
2楼2013-02-01 02:00:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wqj1988926

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

蛋白的表达可以用western blot来进行检测,
风雪夜归人
3楼2013-02-02 17:44:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 枯藤老树216 的主题更新
信息提示
请填处理意见