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greenygreen

银虫 (小有名气)

[求助] HEK293A细胞怪异现象

HEK293A细胞,标准条件培养,传代30代之内。
昨天发现了一个奇怪的现象,传代铺板的时候都正常,转染前的细胞形态也很好,转染之后4小时加DMEM时候,细胞是应激的偏圆形,直到24小时之后仍无法正常生长,还是圆圆的,也不繁殖了。。。但是在大瓶子里养着的细胞都生长的很正常。这是细胞老化的结果么?但是之前也有用30代左右的细胞,转染好好的,24小时之后完全铺满了底面。求助有什么其他可能的原因?培养条件37度,5%二氧化碳,DMEM+10%FBS+1%双抗。转染试剂,lipo2000。
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shujunru

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

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你是用脂质体转染的吗?你转染的质粒是不是采用无内毒素的试剂盒抽提的?如果质粒有内毒素,细胞生长会变得很差,如果你用脂质体转染,加双抗了吗?如果加了双抗,恭喜你,细胞就会死个差不多。取仔细看看你所使用试剂的说明书,那玩意不是摆设。
2楼2013-02-02 12:38:07
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