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greenygreen

银虫 (小有名气)

应助: 12 (小学生)
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在线: 80.2小时
虫号: 2166061
注册: 2012-12-04
性别: MM
专业: 基因表达调控与表观遗传学

[求助] HEK293A细胞怪异现象

HEK293A细胞，标准条件培养，传代30代之内。
昨天发现了一个奇怪的现象，传代铺板的时候都正常，转染前的细胞形态也很好，转染之后4小时加DMEM时候，细胞是应激的偏圆形，直到24小时之后仍无法正常生长，还是圆圆的，也不繁殖了。。。但是在大瓶子里养着的细胞都生长的很正常。这是细胞老化的结果么？但是之前也有用30代左右的细胞，转染好好的，24小时之后完全铺满了底面。求助有什么其他可能的原因？培养条件37度，5%二氧化碳，DMEM+10%FBS+1%双抗。转染试剂，lipo2000。

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1楼 2013-01-30 15:23:35

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shujunru

铜虫 (初入文坛)

应助: 3 (幼儿园)
金币: 21.6
帖子: 30
在线: 18.4小时
虫号: 2058158
注册: 2012-10-13
专业: 生物大分子结构与功能

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

你是用脂质体转染的吗？你转染的质粒是不是采用无内毒素的试剂盒抽提的？如果质粒有内毒素，细胞生长会变得很差，如果你用脂质体转染，加双抗了吗？如果加了双抗，恭喜你，细胞就会死个差不多。取仔细看看你所使用试剂的说明书，那玩意不是摆设。

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2楼2013-02-02 12:38:07

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