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zfyzjh

铜虫 (小有名气)

[求助] 高碘酸钠氧化硫酸软骨素或是透明质酸后氧化度的计算及醛基标准曲线

各位大家好,本人导师最近让我作关于GAGs氧化的课题,包括透明质酸和硫酸软骨素等,主要是采用高碘酸钠将其一个糖环上的相邻两羟基氧化为醛基,然后通过利用戊二醛得到醛基摩尔浓度与吸光度之间变化关系的标准曲线。再通过测定样品(即氧化后的硫酸软骨素和透明质酸,4mg/mL初始浓度)在同条件下的光吸收值通过标准曲线从而得到其所含醛基的浓度。

问题是,得到醛基浓度后我应该怎么计算氧化度呢?因为一个糖环氧华后会有两个醛基那么我是不是应该要将所测得的醛基浓度除以而才能得到氧化后的糖环个数呢?按道理应该使用氧化后糖环数除以总糖环数即得到氧化度的吧,但是总的糖环数是通过用氧化前GAGs的质量除以其分子量吗?谢谢!

另外不知道有没有人做过戊二醛的标准曲线呢?因为我做的曲线用前七个稍高浓度测时R2大概是0.97几,但如果将后面几个数值也加进去就降到0.92左右呢,这样的标准曲线还能用吗?一般作这种标准曲线应该取几个点呢?谢谢
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ruinyan

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
红舟流星: 金币+1, 专家考核, 欢迎来到生物功能材料板块应助交流 2013-02-01 20:43:36
zfyzjh(红舟流星代发): 金币+7, 代扣代发金币 2013-06-30 23:44:56
关于标准曲线问题,通常浓度范围越小越精准,相关系数越高,取点的话至少取5-6个点才可信,我用的相关系数一般达到0.99以上~建议楼主取你需要的浓度区间缩小浓度范围多做几次标准曲线,最好达到0.99以上再用哈~

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8楼2013-02-01 10:05:41
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红舟流星

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【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
fool_proof: 金币+1, 感谢回帖应助~ 2013-01-29 20:39:27
第一个问题你可以看做“被氧化羟基/原总羟基”
红楼一梦终难寻扁舟载酒且慢行落花流水依惜别月伴明星照前路
2楼2013-01-29 20:12:12
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zfyzjh

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 红舟流星 at 2013-01-29 20:12:12
第一个问题你可以看做“被氧化羟基/原总羟基”

但是原羟基量要如何去计算呢?因为一个硫酸软骨素分子上并不只两个羟基。
3楼2013-01-29 20:21:22
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红舟流星

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【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by zfyzjh at 2013-01-29 20:21:22
但是原羟基量要如何去计算呢?因为一个硫酸软骨素分子上并不只两个羟基。...

按照分子式上面的有效羟基计算
红楼一梦终难寻扁舟载酒且慢行落花流水依惜别月伴明星照前路
4楼2013-01-29 21:49:11
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