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30937747木虫 (小有名气)
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[求助]
如何证明某个蛋白是否形成了复合体
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| 想请教一下，有哪些实验方法能够证明一个蛋白有没有自身聚合形成复合体？现在我表达了一个蛋白，但是不知道它是单体发生作用，还是形成了聚合体后发生作用，而且我想知道如果是聚合体，会是几聚体。 |
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【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
30937747: 金币+4, ★★★很有帮助, 能否说的详细点？如果我加SDS，在Native上比不加SDS的分子量要小，就能证明形成的聚合体？但是也还分不清出是几聚体吧？ 2013-01-22 18:00:54
小丹木木: 金币+3, 鼓励应助 2013-04-24 13:35:30
感谢参与，应助指数 +1
30937747: 金币+4, ★★★很有帮助, 能否说的详细点？如果我加SDS，在Native上比不加SDS的分子量要小，就能证明形成的聚合体？但是也还分不清出是几聚体吧？ 2013-01-22 18:00:54
小丹木木: 金币+3, 鼓励应助 2013-04-24 13:35:30
| 一般形成聚合体有可能是分子间的二硫键作用或分子间的作用力。要想知道是不是聚合体、是几聚体，有很多种方法。最简单的方法就是跑个Native电泳，要是蛋白中有cys的话，样品做加还原剂和不加还原剂对比，比较分子量就可以了；要是没有cys，你可以加或不加SDS。还有就是你也可以用凝胶层析的方法看看有几种组分，分子量分别是多少，不过前提是尽量不要有其他未知杂蛋白。 |
2楼2013-01-22 17:36:53