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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 小鼠胚胎干细胞的贴壁问题。
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星星和太阳

金虫 (初入文坛)

[求助] 小鼠胚胎干细胞的贴壁问题。

各位虫友们，是这样，我在培养小鼠胚胎干细胞，在代数比较低的时候，很容易形成EB，贴壁性能很差，随着代数的增加，随着分化，贴壁要稍微好一些，但是还是达不到实验要求，也用明胶处理培养板，现在就是想问一下，和大家交流，明胶处理之后需要用PBS洗培养板吗？明胶对细胞有毒性吗？明胶为什么能促进细胞贴壁？还有什么办法可以促进细胞贴壁啊。
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bluebeder
1楼 2013-01-22 15:14:18
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星星和太阳

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 百奥赛图沈博 at 2013-01-22 18:59:58
最好长在mmc处理的MEF细胞上。如果一定不想用MEF，1%的Gelatin处理平皿也可以的。如果是用PBS溶的，不用洗。但注意gelatin处理的时候不要有蒸发，否则盐浓度太高，会影响细胞生长。

可以肯定地说，用MEF的话，对 ...

嗯，谢谢，我用的Gelatin就是用PBS溶的，下次试试1%的浓度。你说的MEF就是小鼠成纤维细胞吧，滋养层，可是我们实验室没有足够的滋养层细胞，无奈只能用明胶。
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bluebeder
4楼2013-01-22 21:19:11
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美丽传说

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+2, 谢谢参与 2013-01-23 08:37:48
直接买贴壁细胞瓶，都是处理好的，如果是用玻璃瓶，需要用明胶处理，没有毒性。此外加大血清含量，也利于细胞贴壁。
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2楼2013-01-22 16:56:31
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百奥赛图沈博

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+3, 谢谢分享经验 2013-01-23 08:37:57
最好长在mmc处理的MEF细胞上。如果一定不想用MEF，1%的Gelatin处理平皿也可以的。如果是用PBS溶的，不用洗。但注意gelatin处理的时候不要有蒸发，否则盐浓度太高，会影响细胞生长。

可以肯定地说，用MEF的话，对ES细胞要好的多。如果有MEF，细胞会成丘状，在Gelatin上长得话，细胞colony会长扁平。
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3楼2013-01-22 18:59:58
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星星和太阳

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 美丽传说 at 2013-01-22 16:56:31
直接买贴壁细胞瓶，都是处理好的，如果是用玻璃瓶，需要用明胶处理，没有毒性。此外加大血清含量，也利于细胞贴壁。

实验要求，在细胞培养瓶上不能进行啊，没办法，为了促进贴壁，只能用明胶，谢谢了
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bluebeder
5楼2013-01-22 21:21:17
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