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daxiaowoniu金虫 (小有名气)
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[求助]
小蜗牛被二硫键、巯基乙醇难住了，求救
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| 我现在需要把反应产物中的二硫键断裂，查到可以用巯基乙醇断裂，但不知道巯基乙醇与二硫键的比例多少，才能保证把二硫键全部断裂，巯基乙醇也不要过量太多，求 各位大仙帮忙 |
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cpumantiszj
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【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
daxiaowoniu: 金币+5 2013-05-22 14:22:15
感谢参与，应助指数 +1
daxiaowoniu: 金币+5 2013-05-22 14:22:15
| 很多巯基试剂都可以断裂二硫键的，DTT和你说的巯基乙醇都行。小分子巯基试剂断裂二硫键不是看用量的，而是看最终浓度的，即你的样品如果溶解体积是10ml和20ml，所需的巯基试剂的量同样应该加倍（即使你样品的量一样）。给个参考意见，你把巯基试剂的终浓度定位50mM试试看，如果不行适当增减（20-100 mM）。还原过后肯定是要有纯化过程的，而且纯化后的产品要尽快进行下一步反应，否则被还原的产品可能再次被氧化。防止二次氧化的办法是，加巯基试剂的时候适当加些EDTA，除去金属离子（巯基最易被这些离子氧化），和/或让产品保留一定量的巯基试剂（5-20mM）。一点浅见希望对你有帮助。 |
2楼2013-01-19 06:49:52
daxiaowoniu
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。各种崩溃啊 3楼2013-05-22 14:23:27