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xiaoruyi

新虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白定位

质粒myc 与蛋白A 融合,转染MCF7 细胞,48小时后固定细胞,做immunoflurescence。转染方法,Neon 电转染。                                                                                                                                                    很久以前这个实验重复了很多遍,都是一个结果,这个蛋白定位在细胞核。前几天重复了一下这个实验,很郁闷的发现此蛋白又遍布全细胞了,为什么啊?我没有做任何改动,仅仅是重复一下以前的实验,结果却不一样。不但这个蛋白,我另外一个蛋白也出现了一样的结果,从以前定位到细胞核到这次遍布全细胞。

有一点不一样的是我们用于转染的移液枪坏过,然后修过,我严重怀疑移液枪有问题。我的感觉是如果细胞核膜被破坏了,细胞核内的物质就会外泄。求助达人们解释解释。Last minite,马上开committee meeting了,这是我目前最重要的结果,急求解答。
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