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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 生物制药 » 请教做过凝胶分离的同学，谢谢
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laughing111

银虫 (小有名气)

[求助] 请教做过凝胶分离的同学，谢谢

在优化凝胶分离条件，对于在多个馏分中要分开的两个化合物用什么方式表达其分离度比较好呢？
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1楼2013-01-12 17:47:56
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

dylanxue

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

大家的回复都有道理，但是可能大家专业不同基本方法不同。我看楼主是微生物生理与生物化学专业，那我们的专业基本是相同的，说一下我的看法。
首先 楼主你提供的信息太少了，很难给你一个很好的解决方案。
然后 做分离纯化目的是要分开，实验前期分没分开一眼就看出来了，至于想用什么指标来表征分离度，到分离开之后再找不迟。
最后 最分离纯化可以选用的方法很多，很多时候是两三种方法联用的，很少有物质用单一方法可以达到很好的分离效果。
需要的话你可以发站内信联系，一起好好分析一下~
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11楼2013-02-23 13:02:06
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普通回帖

潇洒旅途

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xiaoxiao270: 金币+1 2013-01-13 12:19:49
应该是两种馏分的分子量大小差别吧，差别越大，分离度越大。
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2楼2013-01-12 20:40:00
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laughing111

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 潇洒旅途 at 2013-01-12 20:40:00
应该是两种馏分的分子量大小差别吧，差别越大，分离度越大。

可能是我表达的不太清楚，我们这两个组分在多个馏分中都存在，用什么统计方法表示两个组分的分离度比较好呢？
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3楼2013-01-15 09:40:52
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Cpuli87

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你是使用凝胶后，然后在多个接的馏分中都检测到这两个化合物？是这个意思？
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4楼2013-01-15 09:45:33
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laughing111

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by Cpuli87 at 2013-01-15 09:45:33
你是使用凝胶后，然后在多个接的馏分中都检测到这两个化合物？是这个意思？

恩，是的，用什么方法比较哪个条件分离度略好一些，头疼
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5楼2013-01-15 14:40:25
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Cpuli87

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
karl2100: 金币+1, 谢谢！ 2013-01-18 00:14:33
引用回帖:
5楼: Originally posted by laughing111 at 2013-01-15 14:40:25
恩，是的，用什么方法比较哪个条件分离度略好一些，头疼...

首先看你的分离目的，如果单纯的是分离化合物，说明你这个型号的凝胶，或者说这个洗脱系统，不适合你的这两个化合物的分离，这样可以选择你的柱材料的。如果是必须使用凝胶的话，那么凝胶的型号，洗脱系统，你都要摸索下！一般做植化分离的，实验室常用的凝胶是sepdex LH-20，洗脱系统有：甲醇，甲醇-二氯甲烷，甲醇-水等。
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6楼2013-01-15 15:30:27
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idea2020

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
karl2100: 金币+1, 3Q 2013-01-18 00:14:48
分馏目标成分与其相邻的分馏成分之间的分离度比较准确。
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7楼2013-01-15 15:46:17
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潇洒旅途

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
karl2100: 金币+1, 3Q 2013-01-18 00:15:00
引用回帖:
3楼: Originally posted by laughing111 at 2013-01-15 09:40:52
可能是我表达的不太清楚，我们这两个组分在多个馏分中都存在，用什么统计方法表示两个组分的分离度比较好呢？...

多个馏分中都存在，说明这个分离体系行。如果要知道这两组分在这个分离体系的分离度，前提是这两组分得分开。试试其他分离体系怎样，好像可以用凝胶板分离显色，摸索下分离体系。
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8楼2013-01-15 19:34:04
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xiaolu8185

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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karl2100: 金币+1, 多谢指教！ 2013-01-18 00:15:12
laughing111: 金币+50, ★★★★★最佳答案 2013-05-28 20:57:12
R=2(tR2-tR1)/(w1+w2) 现在你能知道（w1+w2）但不能确定各组分是否呈高斯分布，(tR2-tR1)就没法确定了，只是选个条件的话可以用W12/(W1+W2)来表示，这个数值越小表示分离度越好。不知道我理解的你的提问对不对。
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9楼2013-01-17 09:51:23
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xiaolu8185

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

或者你减少上样量，增加柱长或调低流速来争取分开，再算分离度
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10楼2013-01-17 09:55:05
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