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做电泳时蛋白条带出不来?
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pobiok
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做电泳时蛋白条带出不来?
请教一下,为什么做SDS-PAGE时蛋白的条带出不来,蛋白MARK也出不好?用的是10%的胶,试剂都是新配的.
IMG_20130109_双标.jpg
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1楼
2013-01-10 12:05:07
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malele0208
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专业: 食品科学基础
【答案】应助回帖
我觉得跟你的操作手法也有很大关系,例如上胶的时候,胶面是否平整,还有上胶后要加盖一层2cm水层以防止胶氧化变质,吸取水层立即上下一层胶,这些你做的好吗?每个槽上样量都一致吗?我之前跑不出来是因为电极缓冲液加晚了,后来浓缩胶上完插上梳子立即加电极缓冲液就好一些了。你可以在自己操作上多找原因。
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11楼
2013-05-08 12:08:27
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lizhijiang
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wizardfan: 金币+1, 谢谢参与
2013-01-11 07:59:24
marker跑的不好,可以肯定的原因之一是胶凝的不好。至于其他原因,与你配方和电泳条件有关!
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海上生明月,天涯共此时!
2楼
2013-01-10 12:22:42
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cicelyzh
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pobiok: 金币+1,
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2013-01-10 14:17:53
wizardfan: 金币+2, 谢谢分享经验
2013-01-11 07:59:38
marker跑得不行,觉得你的胶或者电泳条件有问题。再确定一下配方是否正确。胶的前沿不整齐,胶凝的速度是否过快或者过慢?实验室有其他人跑胶吗?效果怎么样?此外,不知道你的胶染了多久,至少脱色不完全。
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3楼
2013-01-10 12:46:06
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pobiok
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3楼
:
Originally posted by
cicelyzh
at 2013-01-10 12:46:06
marker跑得不行,觉得你的胶或者电泳条件有问题。再确定一下配方是否正确。胶的前沿不整齐,胶凝的速度是否过快或者过慢?实验室有其他人跑胶吗?效果怎么样?此外,不知道你的胶染了多久,至少脱色不完全。
我用的配方跟别的实验室是一样的,别的实验室能跑出来。我跑的时候很奇怪,前面几个小时没问题,3-4小时后就分离胶就会有气泡,不知道为什么?
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4楼
2013-01-10 14:17:26
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