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pobiok

新虫 (初入文坛)

[求助] 做电泳时蛋白条带出不来?

请教一下,为什么做SDS-PAGE时蛋白的条带出不来,蛋白MARK也出不好?用的是10%的胶,试剂都是新配的.

IMG_20130109_双标.jpg
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malele0208

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我觉得跟你的操作手法也有很大关系,例如上胶的时候,胶面是否平整,还有上胶后要加盖一层2cm水层以防止胶氧化变质,吸取水层立即上下一层胶,这些你做的好吗?每个槽上样量都一致吗?我之前跑不出来是因为电极缓冲液加晚了,后来浓缩胶上完插上梳子立即加电极缓冲液就好一些了。你可以在自己操作上多找原因。
11楼2013-05-08 12:08:27
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查看全部 20 个回答

lizhijiang

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
wizardfan: 金币+1, 谢谢参与 2013-01-11 07:59:24
marker跑的不好,可以肯定的原因之一是胶凝的不好。至于其他原因,与你配方和电泳条件有关!
海上生明月,天涯共此时!
2楼2013-01-10 12:22:42
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
pobiok: 金币+1, ★有帮助 2013-01-10 14:17:53
wizardfan: 金币+2, 谢谢分享经验 2013-01-11 07:59:38
marker跑得不行,觉得你的胶或者电泳条件有问题。再确定一下配方是否正确。胶的前沿不整齐,胶凝的速度是否过快或者过慢?实验室有其他人跑胶吗?效果怎么样?此外,不知道你的胶染了多久,至少脱色不完全。
3楼2013-01-10 12:46:06
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pobiok

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-01-10 12:46:06
marker跑得不行,觉得你的胶或者电泳条件有问题。再确定一下配方是否正确。胶的前沿不整齐,胶凝的速度是否过快或者过慢?实验室有其他人跑胶吗?效果怎么样?此外,不知道你的胶染了多久,至少脱色不完全。

我用的配方跟别的实验室是一样的,别的实验室能跑出来。我跑的时候很奇怪,前面几个小时没问题,3-4小时后就分离胶就会有气泡,不知道为什么?
4楼2013-01-10 14:17:26
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