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bunntly木虫 (正式写手)
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[求助]
液相色谱
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| 本人研一新生，刚开始接触液相色谱，看了一些文献想问问液相色谱内标法和外标法的区别。我的理解是外标法是用想要测的某物质的纯物质，配制成一系列浓度在进行液相色谱，而后做出标准曲线，然后再将待测样品进行液相分析，通过与标品出峰的对比，确定其出峰位置而后根据标准曲线算得其含量，而内标法好像是选择与待测物出峰位置相近的物质且样品中不含的，加入到样品中进行液相色谱，而后根据与内标物的出峰判定待测物的出峰并计算含量。不知道我的理解对不对啊 还有就是怎么判定混合物中待测成分的出峰位置啊？ |
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4楼2013-01-09 09:40:04
2楼2013-01-09 00:32:16
zhangyuhua12
银虫 (小有名气)
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【答案】应助回帖
★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
bunntly: 金币+2, ★有帮助 2013-01-09 10:10:46
xbqewpq: 金币+1, 感谢应助，欢迎常来分析版交流~ 2013-01-09 20:10:45
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内标法：通过内标物与对照品的浓度、峰高/面积计算校正因子，然后通过校正因子、待测物峰高/面积、内标物浓度、峰高/面积，计算待测物浓度；需要与待测物性质非常相似（如吸收系数、出峰位置，但是不能干扰待测物）的内标物。 外标法：通过对照品浓度、峰高/面积和待测物的峰高/面积，计算待测物浓度。 内标法优劣：1.优势：内标法可以减小样品前处理所造成的误差，如前面那位同学所说的定容过程变得不那么重要——前提是内标物与对照品称量好了在同一个容器中定容；另外，如果是采用手动进样的话，进样量的误差对结果的影响也可避免。 2.劣势：由于内标物选择的诸多要求，合适的内标难以寻找；操作繁琐。外标法劣势及解决：进样量误差对结果影响较大，但现在色谱仪一般都有自动进样器，可解决这个问题。 另外，用内标法或外标法计算待测物浓度的方法，参考中国药典二部。 |
3楼2013-01-09 09:25:13
bunntly
木虫 (正式写手)
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- 专业: 微生物生理与生物化学
5楼2013-01-09 10:11:59