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bunntly

木虫 (正式写手)

[求助] 液相色谱

本人研一新生,刚开始接触液相色谱,看了一些文献想问问液相色谱内标法和外标法的区别。我的理解是外标法是用想要测的某物质的纯物质,配制成一系列浓度在进行液相色谱,而后做出标准曲线,然后再将待测样品进行液相分析,通过与标品出峰的对比,确定其出峰位置而后根据标准曲线算得其含量,而内标法好像是选择与待测物出峰位置相近的物质且样品中不含的,加入到样品中进行液相色谱,而后根据与内标物的出峰判定待测物的出峰并计算含量。不知道我的理解对不对啊 还有就是怎么判定混合物中待测成分的出峰位置啊?
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meixinlu

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
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bunntly: 金币+1 2013-01-09 10:10:55
根据文献记,或者进一针对照品即可。
2楼2013-01-09 00:32:16
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zhangyuhua12

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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bunntly: 金币+2, ★有帮助 2013-01-09 10:10:46
xbqewpq: 金币+1, 感谢应助,欢迎常来分析版交流~ 2013-01-09 20:10:45
内标法:通过内标物与对照品的浓度、峰高/面积计算校正因子,然后通过校正因子、待测物峰高/面积、内标物浓度、峰高/面积,计算待测物浓度;需要与待测物性质非常相似(如吸收系数、出峰位置,但是不能干扰待测物)的内标物。
外标法:通过对照品浓度、峰高/面积和待测物的峰高/面积,计算待测物浓度。
内标法优劣:1.优势:内标法可以减小样品前处理所造成的误差,如前面那位同学所说的定容过程变得不那么重要——前提是内标物与对照品称量好了在同一个容器中定容;另外,如果是采用手动进样的话,进样量的误差对结果的影响也可避免。
2.劣势:由于内标物选择的诸多要求,合适的内标难以寻找;操作繁琐。外标法劣势及解决:进样量误差对结果影响较大,但现在色谱仪一般都有自动进样器,可解决这个问题。
另外,用内标法或外标法计算待测物浓度的方法,参考中国药典二部。
启动一次
3楼2013-01-09 09:25:13
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mogukitty

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
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bunntly: 金币+1 2013-01-09 10:10:34
xbqewpq: 金币+1, 感谢应助,欢迎常来分析版交流~ 2013-01-09 20:10:54
液相色谱多用外标法,因为自动进样系统多用定量环,每针的进样准确度可以保证;
气相色谱多用内标法,因为自动进样系统暴露在空气中,进样与很多因素有关,进样的准确度不如液相色谱,但是用内标法就可以弥补因为进样原因带来的误差。
4楼2013-01-09 09:40:04
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bunntly

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by zhangyuhua12 at 2013-01-09 09:25:13
内标法:通过内标物与对照品的浓度、峰高/面积计算校正因子,然后通过校正因子、待测物峰高/面积、内标物浓度、峰高/面积,计算待测物浓度;需要与待测物性质非常相似(如吸收系数、出峰位置,但是不能干扰待测物) ...

我还想问问 那对于混合物中的某待测组分 怎么判定它的出峰位置呢?与标品对比吗?
5楼2013-01-09 10:11:59
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zhangyuhua12

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
xbqewpq: 金币+1, 感谢应助,欢迎常来分析版交流~ 2013-01-09 20:11:07
有两种方法:
1、已知杂质样品加入法确定(最常用的)
2、就是用GC-MS或HPLC-MS检测杂质的分子量,去推测杂质的名称,从而判断化合物的位置
启动一次
6楼2013-01-09 11:48:06
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2120100604

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
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bunntly: 金币+1, ★★★很有帮助 2013-01-10 12:27:12
可以用标准加入法确定未知组分,加入标准物质后,峰高增加的峰为加入的标准物质的峰。
Observationisthebestteacher.
7楼2013-01-10 10:04:54
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