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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » WB结果分析时，为什么背景灰度值要比目的条带高呢？
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tsyxy421

木虫 (正式写手)

[交流] WB结果分析时，为什么背景灰度值要比目的条带高呢？ 已有3人参与

RT，多谢各位大虾指教！

内参.jpg(55.44KB)
http://kuai.xunlei.com/d/LnU4DScAssLsUAQA6a8?p=130497

[ Last edited by tsyxy421 on 2013-1-9 at 09:08 ]
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沉稳扎实，勤奋刻苦。
1楼 2013-01-08 20:06:58
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
不知道你的疑问在哪里。用的软件一般可以选invert吧，就可以得到灰度相反的图和正常数据。
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2楼2013-01-09 08:31:28
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tsyxy421

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-01-09 08:31:28
不知道你的疑问在哪里。用的软件一般可以选invert吧，就可以得到灰度相反的图和正常数据。

用扫描仪 扫出来以后，Quantityone 分析的时候，还是内参，特别干净，你看一下图片，就是这个情况。
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沉稳扎实，勤奋刻苦。
3楼2013-01-09 09:04:48
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我都是选一排，然后一起定量的，背景用基线correction就可以了。不知道你的情况。
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4楼2013-01-09 12:16:47
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tsyxy421

木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-01-09 12:16:47
我都是选一排，然后一起定量的，背景用基线correction就可以了。不知道你的情况。

问题解决了。
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沉稳扎实，勤奋刻苦。
5楼2013-01-09 12:19:18
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jl860822

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
楼主，您这内参跑的太漂亮了，能说一下要诀吗？我的做出来，会有背景
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6楼2013-01-10 18:22:04
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tsyxy421

木虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by jl860822 at 2013-01-10 18:22:04
楼主，您这内参跑的太漂亮了，能说一下要诀吗？我的做出来，会有背景

多谢夸奖，感觉应该与抗体有关系吗，再就是一二抗浓度不要太高，洗膜我一般11minX3次。
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沉稳扎实，勤奋刻苦。
7楼2013-01-10 20:21:50
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jl860822

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by tsyxy421 at 2013-01-10 20:21:50
多谢夸奖，感觉应该与抗体有关系吗，再就是一二抗浓度不要太高，洗膜我一般11minX3次。...

我们的抗体也还不错的，是cellbio lab的
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8楼2013-01-11 08:23:59
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白小鸵

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
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5楼: Originally posted by tsyxy421 at 2013-01-09 12:19:18
问题解决了。...

楼主，能不能请问下你的问题是怎么解决的，我也遇到了同样的问题，在灰度统计时，背景明明很白，但测出来的灰度值就是比条带高，试了其它一些图片，条带越黑的灰度值反而越低
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小白加鸵鸟
9楼2013-03-16 10:53:07
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tsyxy421

木虫 (正式写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 白小鸵 at 2013-03-16 10:53:07
楼主，能不能请问下你的问题是怎么解决的，我也遇到了同样的问题，在灰度统计时，背景明明很白，但测出来的灰度值就是比条带高，试了其它一些图片，条带越黑的灰度值反而越低...

PS设置一下自动对比度！
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沉稳扎实，勤奋刻苦。
10楼2013-03-17 09:19:25
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