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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 用液相标准曲线法定量已知物的浓度，但是峰形很怪，基线不好，拖尾严重，如何改善？
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Dream-weaver

木虫 (小有名气)

[求助] 用液相标准曲线法定量已知物的浓度，但是峰形很怪，基线不好，拖尾严重，如何改善？

用HPLC标准曲线法定量已知物的浓度，但是需要定量的物质峰形很怪，基线不好，拖尾严重，如何改善？化合物是酰胺，用甲醇溶解的，洗脱体系是乙腈和水，梯度洗脱：0-1min 25%   1-2min升至100%   2-6min 100%   6-7min降至25%   7-8min 25%。请高手指点。附图分别是0.5umol/ml，1umol/ml，2umol/ml，2.5umol/ml时的液相图，最后一张是未知浓度的化合物的液相图。

0.5.png(15.65KB)
http://kuai.xunlei.com/d/LnU4DRTpiZLqUAQA097?p=130497
1.png(15.1KB)
http://kuai.xunlei.com/d/LnU4DRfpoJLqUAQA45e?p=130497
2.png(14.92KB)
http://kuai.xunlei.com/d/LnU4DR3p05LqUAQA1cc?p=130497
2.5.png(14.72KB)
http://kuai.xunlei.com/d/LnU4DSfpNZPqUAQA4cc?p=130497
未知.png(15.62KB)
http://kuai.xunlei.com/d/LnU4DSzpWpPqUAQAf42?p=130497
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1楼 2013-01-07 17:21:47
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鸡鸣不已

铜虫 (正式写手)
你好，我看了一下你的图，前面的是色素吗？计算到峰面积吗
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7楼2013-09-22 14:10:38
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wy1518

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
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Dream-weaver: 金币+5 2013-01-08 09:46:30
你的物质在水中不稳定 会水解 所以基线不好 试试加点酸
有残留或进样量大 会拖尾
溶剂最好用流动相溶液来配

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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2楼2013-01-07 20:51:32
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duliuhui

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
Dream-weaver: 金币+5 2013-01-08 09:46:48
基线应该是梯度造成的吧，个人觉得还能接受，如果可以的话换等度就OK了。
拖尾也不太严重吧，影响积分结果和线性了么？改变稀释溶剂或流动相加点酸、碱调节PH应有改善。
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3楼2013-01-07 23:01:39
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ruiyi1101

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西湖醉鱼: 金币+1, 欢迎常来分析版讨论问题 2013-01-08 13:36:36
从你的梯度洗脱程序看，当2 - 6分钟 100% 乙腈（如果我没有猜错的话）时，主峰在3.66分钟出峰，个人觉得你的液相方法不妥当，因为在反相梯度程序中一般不会用100%有机相，洗脱目标检测物质的，是打算快速检测分离？

看你的色谱运行时间约8分钟，是用UPLC还是HPLC？
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4楼2013-01-08 11:04:26
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