24小时热门版块排行榜    

查看: 814  |  回复: 7

alman001

铜虫 (小有名气)

[求助] RACE基因克隆5'总是到不了头

本人从甘薯中同源克隆一个基因,做5'RACE总是到不了头,每次做出的结果总是止步于特定位置的氨基酸就再也不往5'端走了,这是怎么回事呢?是不是我做的基因5'端结构比较复杂啊,怎么解决呢?做了好久了,急啊,求助大家帮我想想办法!多谢!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

有事做,无事争
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

titus0805

铁虫 (小有名气)

多长的基因啊?用哪种方法?
2楼2013-01-07 18:07:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mjn404

新虫 (初入文坛)

我也是啊!
3楼2013-01-07 19:57:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

alman001

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by titus0805 at 2013-01-07 18:07:10
多长的基因啊?用哪种方法?

约2KB,用的takara 5' RACE的盒子,请问您有什么好办法吗??谢谢啊!
有事做,无事争
4楼2013-01-08 21:24:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

titus0805

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

takara的5'race做出来应该就倒头了。你是怎么确认没有到头的呢?没有起始密码子?
不能完全按同源物种里面序列的长短判断,只要有完整读框,符合kozak规则就行了
5楼2013-01-11 22:19:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (职业作家)

Matlab专家

本帖仅楼主可见
6楼2013-01-12 00:00:09
已阅   申请农林EPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

wangbuliuxin

新虫 (初入文坛)

请教楼主,是如何根据同源基因克隆序列设计引物的
7楼2013-03-22 19:48:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

longanzz

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

换用不同的方法试一下。我原来也是一个基因很难做出,后来使用不同的方法做出来了。再就是翻转后的产物最后直接做RACE,不要放的太久了。祝顺利!
8楼2013-03-23 07:05:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 alman001 的主题更新
信息提示
请填处理意见