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提取一种微型动物DNA，怎么也提不出来，帮忙出出主意
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大家可能都知道能寄生在人脸上的螨虫（蠕形螨科）， 我现在的实验对象就是螨虫，不过和寄生在人身上的螨不属于同一科，其成虫体壁很厚，包含蜡质层 几丁质 ＝＝，体长仅有０.４mm左右，十分小， 关键是组织破碎，释放DNA，但因为体形太小，一直找不到合适的方法， 各位虫侠给点意见 谢了先 |
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glucidum
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3楼2007-07-31 09:48:13
xiaopu_yin
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- 专业: 微生物遗传育种学
2楼2007-07-31 06:40:31
4楼2007-07-31 10:25:01
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估计一些常规的方法你都试过，有没有想过在溶液中加几丁质酶，消化一部分虫体壁？ --------------------------------------------------------- 回复2楼;想过了，一直想买,买不到,好象这种酶不常用, ---------------------------------------------------------- 如果LZ只是需要提取一点点DNA 来做PCR,进行系统分析的话.建议试试在解剖镜下直接用镊子碾碎虫体然后加入蛋白酶消化处理。消化处理的溶液即可直接用做PCR,不需要再做沉淀处理等等。 具体方法LZ可以参考果蝇系统分析研究中DNA处理方法,只是要多一步机械破碎吧 -------------------------------------------------------- 回复3楼::我都用昆虫针刺破了,但在转移到离心管中可能损失很多,所以没有保证,偶尔能提出来,而且太费时了 --------------------------------------------------------- 超声破碎或高速球磨等机械方法肯定能够破碎，用研磨也可以，剩下的就听3楼的吧，开始我也没有想到PCR扩增，总是不做这方面的事，生疏了。 ---------------------------------------------------------- 回复4楼:超声破碎或高速球磨等机械 实验条件差,没这些仪器...... ----------------------------------------------------------- 最后感谢三位虫友的回复 |
5楼2007-07-31 20:33:07
