24小时热门版块排行榜    

查看: 536  |  回复: 5
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

zzhhaaoouu

银虫 (小有名气)

[交流] 还是酶切 已有3人参与

只有两个酶切位点的质粒单酶切,预期有两个目的条带(质粒,目的片段),现在出来4个条带,可能的原因是什么,请高手分析!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhang881007

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
检查你自己的酶用量,是否完全水解质粒。 是否有可能是,环状质粒,单酶切质粒?
shine
3楼2013-01-05 11:01:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

Marado

金虫 (正式写手)

Dreamer


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
目的片段确定没有多余的酶切位点麽,还有质粒上有没有你的酶切位点,另外酶切时间多久,这些都可能造成得不到预期的实验结果
Look,ifyouhadoneshot,oroneopportunity,toseizeeverythingyoueverwanted,inonemoment.Wouldyoucaptureit,orjustletitslip?
2楼2013-01-05 10:56:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zzhhaaoouu

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by Marado at 2013-01-05 10:56:14
目的片段确定没有多余的酶切位点麽,还有质粒上有没有你的酶切位点,另外酶切时间多久,这些都可能造成得不到预期的实验结果

确定没有多余的酶切位点;酶切37度时间7分,说明书建议5分,难道是时间太长了?
4楼2013-01-05 13:47:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zzhhaaoouu

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by zhang881007 at 2013-01-05 11:01:48
检查你自己的酶用量,是否完全水解质粒。 是否有可能是,环状质粒,单酶切质粒?

20微体系,1微的酶,完全按protocol添加,是的单酶切质粒
5楼2013-01-05 13:48:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分? +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +17 Lanmanbaby 2026-08-09 29/1450 2026-08-12 00:24 by zhanghaozhu
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +7 布布和一二 2026-08-10 9/450 2026-08-11 22:12 by 医学老男孩
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +3 yuleib84 2026-08-11 3/150 2026-08-11 21:53 by jnhyjjm
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +3 majunge000 2026-08-11 4/200 2026-08-11 20:13 by lch2012
[论文投稿] 职称评审,求友友推荐见刊最快的期刊 +3 工厂打螺丝 2026-08-08 3/150 2026-08-11 13:42 by 会议编辑
[基金申请] FileCode能看出啥? +7 要乐观耀哥 2026-08-10 17/850 2026-08-11 10:50 by 要乐观耀哥
[基金申请] filecode +9 documentary 2026-08-10 9/450 2026-08-11 10:08 by wk7465
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +8 家与远方 2026-08-10 13/650 2026-08-11 09:49 by 家与远方
[基金申请] 基金中了 +15 laoda193707 2026-08-06 15/750 2026-08-11 00:11 by jiafei2190
[基金申请] 关于代码变化问题,想知道的进来 +17 且听虎啸 2026-08-07 24/1200 2026-08-10 18:35 by zhangduo2008
[基金申请] 静等基金结果 +5 gjjjzhong 2026-08-10 16/800 2026-08-10 17:19 by Tide man
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +3 majunge000 2026-08-10 3/150 2026-08-10 15:46 by lch2012
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] fileCode有新解读? +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于filecode,很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 大家散了吧,后缀研究没有意义,别浪费时间了,过好目前的每一天,不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
信息提示
请填处理意见