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dqf256196

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助关于发酵罐染菌 已有1人参与

问题描述:15L发酵罐染菌  即使单纯的培养基灭菌后,没有任何其他操作,跑空白也会染菌
   1.灭菌之前保压实验24h 2公斤压力降至1公斤 设备验漏找不到泄露的部位,即便如此按照厂家的说明书,保压是合格的(厂家的标准是1h内降低不超过0.01公斤)

  2.滤芯是新的,赛多利斯,使用之前验过符合标准(泡点实验)补充曾更换两次新的滤芯,依然染菌。

  3.灭菌后在未通入空气前取样于摇瓶中,培养之未见染菌
  已做过7~8罐,情况类似,都在运行一天后染菌现象开始显现,实在找不到原因了,各位有什么建设性意见,指导一下,先行谢过
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wgy2007

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
zhang8826857: 金币+2, 鼓励交流 2013-02-28 23:43:56
根据染菌的现象判断应该是培养基灭菌不彻底造成的,而不是罐本身的问题,我以前也遇到过这种情况,灭完菌后取无菌样培养不染菌,但是罐上还是染菌,可以考虑升高灭菌温度或延长灭菌时间。
    如果培养基中有玉米浆或其它带菌的原料,可以先把这些原料稀释5倍左右在灭菌锅内先灭一次菌,然后再加到罐中与其它的培养基成分一起灭菌,试一试应该可以解决染菌的问题,祝你好运。
18楼2013-01-08 15:00:02
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tianhome

木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励应助! 2013-01-05 18:56:15
非常理解你的痛苦,建议不接种运行一下,要有培养基。如果不染菌,说明种子有问题,如果染菌说明灭菌或通气系统有问题。
虫洞
2楼2013-01-05 03:38:57
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zhaodahe

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
zhang8826857: 金币+1, 鼓励应助 2013-01-06 22:47:50
是污染了什么菌呢?如果能排除种子的问题,有时候发酵罐生锈的地方容易藏菌,可以把发酵罐不发培养基高压空灭一次;如果还不保险就按除芽孢的方法试试。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
3楼2013-01-05 08:06:47
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oldflying

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
zhang8826857: 金币+1, 鼓励交流 2013-02-28 23:42:56
两种可能:1、种子已经被污染了;2、发酵罐的通气管道被污染了。可以加入培养基但不接种验证一下。
一个人的努力和坚持!
4楼2013-01-05 08:34:06
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