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zhaodahe

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
19楼: Originally posted by WAX2010 at 2013-01-04 21:01:30
我看了一下,黑暗中不发光,看来我说是生物发光是不正确的,多谢多谢...

黑暗中不发光,确实不像生物发光。你还要确定是否是类似于gfp,需要激发光激发;用酶标仪测一下不同波长的激发光激发是否有释放光。确定了现象再进行后续实验会稳妥一些。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
21楼2013-01-04 22:13:03
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Eureka120

铁杆木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我做过生物发光工程菌的一些实验,很多细菌都具有一种叫 quorum sensing的机理,尤其是生物发光菌。这个机理简单的说就是细菌在生长的过程中能分泌某种特殊的诱导剂,当这种诱导剂的浓度达到一定阈值时,会触发某种生化过程,比如说生物发光。有很多相关的文献可以查到发光菌诱导剂的具体化学结构。
从你的描述看来,上清液有荧光现象,我觉得应该是细菌分泌的某种诱导剂导致的。另外,当你正常培养的时候没有这种现象,可能是因为这些荧光物质参与细胞反应被正常细菌给代谢掉了,所以我估计这也是为什么只有你从废液中收集的上清液是才有荧光。
希望对你有用。

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快乐每一天
22楼2013-01-05 00:30:57
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
10楼: Originally posted by WAX2010 at 2013-01-04 20:12:39
1. 发光的应该不是菌,因为3000g,5min离心后,荧光并没有减弱很多,但也有一点点变弱,减弱不知是不是因为菌的折射造成光强改变。
2. GFP最佳激发应该在488nm左右,是不是紫外激发不合适
3. 因为不是做这个方面的 ...

会不会是工程菌裂解了,但荧光产物还在?
23楼2013-01-05 08:32:41
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keven7928

至尊木虫 (知名作家)

水手


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
实验中处处留心就有意外发现,我觉得楼主是个细心之人,以后肯定会有所成就,我不是搞生物学方面的,我是搞药物和化学方面的,所以我觉得你要重复一下你的这个过程,看看是不是还有类似现象,如果有,你要用排除法找到发光体,才知道如何去研究,在一个混合体系中很难去研究下去的。祝好!关注你的成功!

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坚持到底就是胜利
24楼2013-01-05 10:02:05
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WAX2010

银虫 (小有名气)

引用回帖:
21楼: Originally posted by zhaodahe at 2013-01-04 22:13:03
黑暗中不发光,确实不像生物发光。你还要确定是否是类似于gfp,需要激发光激发;用酶标仪测一下不同波长的激发光激发是否有释放光。确定了现象再进行后续实验会稳妥一些。
...

是的,我有时间先测一下上清或者菌液的一些发光性质,等有了结果再给你说明。因为我用诱导表达GFP的菌液测过,看不到光,所以感觉应该不同
大手牵小手
25楼2013-01-05 10:39:24
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26楼2013-01-05 11:04:56
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任天青

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
目测楼主蛇年会火,留名。祝成功。很想了解到底是怎么回事。

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实验虐我千百遍,我待实验如初恋...
27楼2013-01-05 11:55:52
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zhaodahe

木虫 (正式写手)

引用回帖:
25楼: Originally posted by WAX2010 at 2013-01-05 10:39:24
是的,我有时间先测一下上清或者菌液的一些发光性质,等有了结果再给你说明。因为我用诱导表达GFP的菌液测过,看不到光,所以感觉应该不同...

好,祝你实验顺利!
28楼2013-01-05 13:54:52
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WAX2010

银虫 (小有名气)

送鲜花一朵
引用回帖:
22楼: Originally posted by Eureka120 at 2013-01-05 00:30:57
我做过生物发光工程菌的一些实验,很多细菌都具有一种叫 quorum sensing的机理,尤其是生物发光菌。这个机理简单的说就是细菌在生长的过程中能分泌某种特殊的诱导剂,当这种诱导剂的浓度达到一定阈值时,会触发某种 ...

谢谢你给我的启发,祝你实验顺利
大手牵小手
29楼2013-01-05 14:45:13
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WAX2010

银虫 (小有名气)

引用回帖:
23楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-01-05 08:32:41
会不会是工程菌裂解了,但荧光产物还在?...

感觉可能性不大,因为现象是可逆的。放置一段时间,菌液变成黄色,摇一摇又可以变成蓝绿色。况且我从菌液中吸了一点到新的LB中,重新摇起来的菌液也是相同的现象,之前可能存在工程菌的裂解,重新摇起来的菌液应该不会吧。
大手牵小手
30楼2013-01-05 14:49:26
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