24小时热门版块排行榜

返回列表

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

821078607

银虫 (小有名气)

应助: 1 (幼儿园)
金币: 792.6
散金: 13
红花: 1
帖子: 256
在线: 59.9小时
虫号: 1261605
注册: 2011-04-11
专业: 光谱分析

[求助] RT-PCR实验操作过程中遇到的问题已有1人参与

各位实验高手大家好！
PCR菜鸟请教大家一个小问题，我采用RT-PCR做半定量测定时一般平行做三分样品，最后扩增的三条曲线不怎么重合，有时差别还很大。我一般加完样后，用枪头混合样品15下左右，最后枪头上可能会残留点点样品。
请问大家有没有遇到三条线不重合这个问题，有什么好的建议和意见吗？还有大家加完样后需不需要用枪头混合均匀？
期待大家的答复，先谢谢各位！

回复此楼

» 猜你喜欢

1楼 2013-01-02 15:10:53

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

821078607

银虫 (小有名气)

应助: 1 (幼儿园)
金币: 792.6
散金: 13
红花: 1
帖子: 256
在线: 59.9小时
虫号: 1261605
注册: 2011-04-11
专业: 光谱分析

引用回帖:

10楼: Originally posted by nuoyaeva at 2013-01-03 16:04:24
平行做三分样品，你是每一步都是分开加的吗？还是事先都混好了，只是在最后一步向PCR板点样的时候，分别点3个样？如果是前者，出现曲线不重合很正常，如果是后者，一般是你的加样枪有问题，或者机器有问题。
另：单 ...

先混好了，最后加的样品，加完样后用枪头吹打混合10-20下，枪头上会有残留，如果不混又担心样品不均匀也会引起大的差异，所以请教一下你是怎么进行加样操作的。