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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 金葡菌如何计数呢？用OD值行吗？数量级是多少呢？
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zl901203

至尊木虫 (小有名气)

[交流] 金葡菌如何计数呢？用OD值行吗？数量级是多少呢？ 已有2人参与

如题，平板计数有点慢，但OD计数不知道在哪个波长，知道OD值如何换算为菌浓？谢谢大家~~~另外还有其他计数方法吗？
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工作了，也离不开研究~~沉下心来，积淀自己~
1楼 2012-12-30 21:49:38
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回帖置顶 ( 共有1个 )

mizhoulong

木虫 (著名写手)

环境卫生、微生物学
★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
rainwander: 金币+4, 鼓励交流 2012-12-31 21:33:01
rainwander: MicEPI+1 2012-12-31 21:33:09
这个怎么说呢，无论接种多少环，2环也好，5环也好，10环也好，在24小时内，都会达到最高浓度，细菌的绝对量只跟体系的量（如多少毫升）有关系，而浓度只能达到一个最高点。所以，接种1环与接种10环的效果完全是一样的。

至于想达到更高的浓度，貌似10E9已经是极限了吧，也可能达到10E10，如果想获得更高的浓度，只能借助于离心重悬了，即使这样，更高的浓度也很难达到。

“24小时比12小时的还少了一个数量级，但吸光度比12小时要高”微生物试验，什么都可能发生。但是按照常规来说，这个可能性不太大，分析下原因：
1、试验失误，导致出现此结果；——最有可能的
2、金葡菌在12小时达到指数生长期的高峰，24小时进入衰退期，导致细菌平板计数降低，但大量死细菌导致浊度高——这个可能性不大，细菌一般在16-24小时都能维持在指数期的后期，即平台期，这个阶段一般来说，细菌计数是相对恒定的。

所以，最有可能的还是实验操作上的问题。

[ Last edited by mizhoulong on 2012-12-31 at 12:03 ]
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环境卫生、微生物学、卫生应急
4楼2012-12-31 12:00:49
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mizhoulong

木虫 (著名写手)

环境卫生、微生物学
好像你问了很多类似的问题了，不要在想什么捷径了，老老实实回实验室开工吧。
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环境卫生、微生物学、卫生应急
2楼2012-12-31 02:41:42
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zl901203

至尊木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by mizhoulong at 2012-12-31 02:41:42
好像你问了很多类似的问题了，不要在想什么捷径了，老老实实回实验室开工吧。

其实我也用平板涂过，但24小时比12小时的还少了一个数量级，但吸光度比12小时要高，就是不知道什么原因~~但实验室师兄师姐也都用的这个，所以想搞清楚一点~~另外如果30mL的肉汤培养基接种5环可以吗？以前我接种了2环3环都没有达到我想要的浓度，我想让菌浓能大一点~~想达到10的10次方。就是不知道接的环数多了以后会不会影响菌的生长？非常感谢您~~~
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工作了，也离不开研究~~沉下心来，积淀自己~
3楼2012-12-31 10:33:34
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zl901203

至尊木虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by mizhoulong at 2012-12-31 12:00:49
这个怎么说呢，无论接种多少环，2环也好，5环也好，10环也好，在24小时内，都会达到最高浓度，细菌的绝对量只跟体系的量（如多少毫升）有关系，而浓度只能达到一个最高点。所以，接种1环与接种10环的效果完全是一样 ...

涂平板计数的不是同一瓶培养液，但都接了两环，这个差距应该不会有一个数量级吧，至于操作上的我觉得没有问题呀，都是无菌操作。现在纠结是用12个小时的还是24小时的，如果想知道12小时的菌浓，涂平板要24小时才知道结果，那这24小时的培养瓶要放到4度冰箱吗？可以放多长时间呢？太麻烦你了，谢谢你啊~~
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工作了，也离不开研究~~沉下心来，积淀自己~
5楼2012-12-31 13:50:58
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mizhoulong

木虫 (著名写手)

环境卫生、微生物学
★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
rainwander: 金币+3, 鼓励交流 2013-01-01 08:27:54
不会有差别，如果两瓶的培养基是一起配的，等同的，接种的细菌来源也一样，培养条件一致的话，那么相同的培养时间内，这两瓶的细菌浓度是相同的。

楼主微生物试验还是做得少。微生物去却与化学物质的最主要的一个特征就是：微生物试验不具有复检性。也就是说微生物试验具有时效性。

科学研究有三种数据获得和处理方法，即：经验主义、试验数据、数理推算。

所以说，微生物实验的很多数据是基于经验主义的，掌握了这个经验值，在实验时然后进行推算。

基于你问的问题，使用OD测定的方法，立刻就能知道浓度。
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环境卫生、微生物学、卫生应急
6楼2013-01-01 02:46:13
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creat001

新虫 (初入文坛)
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
zhang8826857: 金币+5, 鼓励新虫 2013-01-19 21:28:57
OD值计数差别是比较大的，而且不是很准，最准确的就是平板计数，其实不麻烦。我们通常是划斜面时记住划了多少下，我一般是60下左右，然后培养18小时或24小时，总之是时间固定，然后用不同体积的PB洗脱菌，倒平板计数，以后也如此，基本不会有多大差距。
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7楼2013-01-18 20:47:34
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