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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 有没有用过XmnI这个酶的?酶切后连接需要注意什么问题么？
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stardu

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by hyacinth326 at 2012-12-29 15:59:37
估计你酶切后的载体浓度太低了，你可以提质粒的时候浓缩一下，这个载体拷贝数很低很低，好像是1~5copy/cell，慢摇的时候我都是30度，100rpm，1h，用SOC复苏的

你好！ 请问这个转化是用电击转化到DH5α中还是直接就可以常规热激转化到DH5α中？
希望你看到后能回复我，谢谢，万分感谢！
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11楼2013-01-07 22:40:08
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hyacinth326

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
stardu: 金币+5, ★有帮助 2013-01-11 17:16:41
摇菌过程是慢摇的，200rpm太高了，这个质粒我所有的培养都是30度，连接酶多加点没关系的，你没有磷酸化的载体自连都不长的话，那就不是连接体系比例的问题了，估计是连接的问题，感受态细胞的问题，转化的问题，都有可能，一项一项排除吧
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12楼2013-01-10 11:13:13
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bainaling

铁杆木虫 (正式写手)
楼主已经把这个弄好了吧，可否指点我一下 我也弄好了好久还没弄好。。。。
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13楼2014-07-07 10:40:06
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