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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 挥大泪求助啊，细胞状态越来越差还变少，什么原因啊（觉得不太像污染）
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Lynn和Mia

金虫 (小有名气)

[求助] 挥大泪求助啊，细胞状态越来越差还变少，什么原因啊（觉得不太像污染）

同一天复苏的U937细胞，状态更差的都长好并冻存上了，状态稍差一点点的两瓶在即将冻存和传代的时候，换了新一瓶血清后，细胞就开始增值的慢并且减少，加大FBS至20%培养，三天培养液也没怎么变黄（以前都是变黄了表示细胞长得快该换液了），且晃动时肉眼看不到细胞了（之前可以看到），培养液澄清，未有菌丝、串珠、杆状或蠕动小黑点。再次换以20%FBS的1640，四天了！！！四天了！！！培养液还是换时候的颜色，澄清，无菌丝、串珠、杆状或蠕动小黑点，且镜下细胞大幅减少。我都要崩溃了，本来都要准备加药了，现在这个样，我不知道是哪种污染？还是新血清不好？1640是从复苏开始一直在用的同一瓶，血清是同一家代理公司买的hyclone南美胎牛血清。我觉得基本可以排除细菌真菌污染， 但不知支原体污染是几天可以看出症状？这已经7天了。到底是啥原因跪求各位高手指点！！！感激不尽，多少金币也奉上！！谢谢啊
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1楼 2012-12-28 15:37:41
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Lynn和Mia

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 448935271 at 2012-12-28 16:40:42
我觉得比较像支原体污染的，要不你加点拜有利试试，看看能不能抑制支原体生长，再或者买个专测支原体的试剂盒，做做pcr来确定一下

我查了一下午的细胞污染和图片，但是我这个前前后后已经7天了，支原体污染是不是该有啥症状出来了啊？可我还是澄清不变色，小黑点也很少，正常黑点数啊那种，也不是小黑点，有点还比较大，不是沙子样，就像一直养的时候那种蛋白质沉淀的东西。而且，很重要的一点是，四天前我换的液，四天后培养液颜色没有变，然后我今天中午十二点还是换了液，用了自己的血清和别人的血清作对比，四个小时后，我去看细胞，发现变化很大，如图，最上面小瓶是别人血清，中间第一个大瓶是我的血清，最底下大瓶是别人血清，我先换的大瓶的液，再换的小瓶的液，四个小时后，小瓶明显变黄，大瓶基本还没变
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4楼2012-12-28 17:16:31
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448935271

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
Lynn和Mia: 金币+6, ★有帮助, 感谢积极回帖，但是再看看我图片试试 2012-12-28 17:10:20
我觉得比较像支原体污染的，要不你加点拜有利试试，看看能不能抑制支原体生长，再或者买个专测支原体的试剂盒，做做pcr来确定一下
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万物皆有毒，只要剂量足
2楼2012-12-28 16:40:42
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美丽传说

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
yqbter: 金币+2, 鼓励发帖！ 2012-12-28 17:02:18
Lynn和Mia: 金币+6, ★有帮助, 谢谢回帖~~~ 2012-12-28 17:20:00
你描述的像是黑胶虫，建议你换血清
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3楼2012-12-28 16:49:21
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Lynn和Mia

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 美丽传说 at 2012-12-28 16:49:21
你描述的像是黑胶虫，建议你换血清

我刚刚仔细去看了细胞，没有沙子一样多的小黑点，只有正常以前也有的那种血清变形蛋白那种黑东西，也不多，而且并不蠕动，谢谢回帖
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5楼2012-12-28 17:19:31
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