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miraclechu

金虫 (小有名气)

[求助] 有关脂肪酸甲酯化的问题 已有2人参与

最近在做细菌脂肪酸的提取和测定,需要将脂肪酸甲酯化后跑GC-MS,查阅了相关的文献,发现用的最多的是Morrison and Smith(1964)的方法,即三氟化硼甲醇溶液甲酯化,文献中有这么一段话
Boron fluoride-methanol reagent was added under nitrogen, in the proportions 1 ml reagent per 4-16 mg of lipid, and the tube was closed with the screw cap. The tube was then heated in a boiling water bath for the requisite time, cooled, and opened. The esters were extracted by adding 2 volumes of pentane, then 1 volume of water, shaking briefly, and centrifuging until both layers were clear.
三氟化硼不是和水剧烈反应么,这里加水会不会和三氟化硼反应啊

还有就是这篇文献就是将三氟化硼甲醇溶液加到脂肪酸里拧上盖子100摄氏度水浴2min就可以,这和国标用冷凝管回流什么的简化了不少,能达到良好的甲酯化效果么,我看到有的文献还有在瓶子里拧上盖子100度水浴40min的 = =

第一次做相关的实验完全没经验啊,大神们求解答啊,谢谢谢谢
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RachelJan❤||祖国尚未统一,别和哥谈爱情......
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dongmengna

新虫 (小有名气)

您好,请问你做了细菌脂肪酸测定实验了吗?我也要做这个实验,我想请教一下从发酵液中离心的菌体要做什么处理,湿菌体可以直接提取脂肪酸吗?
13楼2016-09-17 20:10:32
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suiweiwei

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这个是不用加水的,我做的是从微藻里提取脂肪酸,甲酯化就是直接加的三氟化硼甲醇溶液,100度反应了2小时,用GC测的很好
己所不欲,勿施于人
2楼2012-12-27 16:00:04
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suiweiwei

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励交流! 2012-12-28 20:47:46
可以多加一些甲醇,在加热反应的时候密封性不太好保持,我做的时候一般会再多加点甲醇,三氟化硼甲醇溶液比较贵,甲醇便宜,一般是加的1:1
己所不欲,勿施于人
3楼2012-12-27 16:02:04
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miraclechu

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by suiweiwei at 2012-12-27 16:00:04
这个是不用加水的,我做的是从微藻里提取脂肪酸,甲酯化就是直接加的三氟化硼甲醇溶液,100度反应了2小时,用GC测的很好

你看我给的那段文献中说的是甲酯话之后萃取产物时先加戊烷再加水,你萃取甲酯话产物用什么啊,还有你就直接将物质加入反应的小瓶中拧上盖子放在水浴里么
RachelJan❤||祖国尚未统一,别和哥谈爱情......
4楼2012-12-27 18:56:55
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