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miraclechu

金虫 (小有名气)

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[求助] 有关脂肪酸甲酯化的问题已有2人参与

最近在做细菌脂肪酸的提取和测定，需要将脂肪酸甲酯化后跑GC-MS，查阅了相关的文献，发现用的最多的是Morrison and Smith（1964）的方法，即三氟化硼甲醇溶液甲酯化，文献中有这么一段话
Boron fluoride-methanol reagent was added under nitrogen, in the proportions 1 ml reagent per 4-16 mg of lipid, and the tube was closed with the screw cap. The tube was then heated in a boiling water bath for the requisite time, cooled, and opened. The esters were extracted by adding 2 volumes of pentane, then 1 volume of water, shaking briefly, and centrifuging until both layers were clear.
三氟化硼不是和水剧烈反应么，这里加水会不会和三氟化硼反应啊

还有就是这篇文献就是将三氟化硼甲醇溶液加到脂肪酸里拧上盖子100摄氏度水浴2min就可以，这和国标用冷凝管回流什么的简化了不少，能达到良好的甲酯化效果么，我看到有的文献还有在瓶子里拧上盖子100度水浴40min的 = =

第一次做相关的实验完全没经验啊，大神们求解答啊，谢谢谢谢

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RachelJan❤||祖国尚未统一，别和哥谈爱情......

1楼 2012-12-26 22:33:03

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

叶之殇

铁虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

引用回帖:

5楼: Originally posted by suiweiwei at 2012-12-28 09:32:26
我是甲酯化之后用正己烷萃取的，然后再旋蒸浓缩。我觉得应该不加水吧，加的话也应该加稀的氯化钠水溶液，可以使其更有效的分层，但一般我们甲酯化之后是不加的。我做的GC也能把细菌的测出来。可能方法不一样吧，我用 ...

二氯甲烷甲醇溶液本身就是三氯甲烷甲醇溶液的一种改版，回收率几乎不变的。目前还有改用其他溶剂进行萃取的方法，常用的有二甲氧基甲烷：甲醇（4:1，v/v）；正己烷：异丙醇（3:2，v/v）；正己烷：甲醇（1:1，v/v），乙醚：乙醇（1:3，v/v）。