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M110899

金虫 (正式写手)

[求助] WB问题求助

目的基因连接pET系列载体，融合蛋白免疫动物制备的多抗，能否检测目的基因连接EGFP载体的融合蛋白？谢谢各位
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1楼 2012-12-24 15:36:52
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-12-24 19:11:39
M110899: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2012-12-24 21:18:37
虽然你的问题问得很绕。我认为你想说制备的抗体是否可以检测目的基因的其它融合蛋白。我认为是可以的。因为你制备的是多抗，虽然不知道你原来融合的是什么标签，但是抗体应该既可以检测目的基因蛋白，也可以检测标签蛋白。如果目的基因与其它标签融合，应该可以用你做的抗体检测。
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2楼2012-12-24 16:49:48
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gzl1988

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
M110899: 金币+3, ★★★很有帮助 2012-12-24 21:18:00
可以检测的，这样没问题，以前实验室做过
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OhGod
3楼2012-12-24 17:20:03
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M110899

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-12-24 16:49:48
虽然你的问题问得很绕。我认为你想说制备的抗体是否可以检测目的基因的其它融合蛋白。我认为是可以的。因为你制备的是多抗，虽然不知道你原来融合的是什么标签，但是抗体应该既可以检测目的基因蛋白，也可以检测标签 ...

谢谢，明白了。
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4楼2012-12-24 21:20:21
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jl860822

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
M110899: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-12-25 09:31:31
应该是可以的吧，你的多抗就是抗你的目的蛋白的嘛
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5楼2012-12-25 08:56:03
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ccharlien

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
M110899: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-12-25 09:31:37
没问题，也可以用tag的抗体验证

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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6楼2012-12-25 09:10:46
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M110899

金虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by jl860822 at 2012-12-25 08:56:03
应该是可以的吧，你的多抗就是抗你的目的蛋白的嘛

谢谢了
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7楼2012-12-25 09:31:26
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M110899

金虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by ccharlien at 2012-12-25 09:10:46
没问题，也可以用tag的抗体验证

谢谢了，弱弱的问下，那检测出的蛋白大小是融合蛋白的还是仅仅是目的蛋白的大小？
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8楼2012-12-25 09:32:34
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ccharlien

木虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by M110899 at 2012-12-25 09:32:34
谢谢了，弱弱的问下，那检测出的蛋白大小是融合蛋白的还是仅仅是目的蛋白的大小？...

是融合蛋白的大小
如果有内源性表达的话也可以检测出目的蛋白
前提是抗体足够好用
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9楼2012-12-25 09:45:54
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