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sls19881024

银虫 (小有名气)

[求助] 新手求助

我最近用同一对引物去扩增同样的底物，扩出片段大小400bp左右，连接19T后转化测序，但测序的结果显示，每个样品之间都相差十个左右的碱基，这会不会是同一个基因的序列啊？但这么短的片段咋会有那么多的错配呢?这个基因是个家族基因       求高手指点！
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小松
1楼 2012-12-23 16:39:46
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ccharlien

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
amisking: 金币+1, 鼓励发帖交流问题。 2012-12-23 21:58:35
相差的碱基是在什么位置？
模板是什么？
你看看你的基因信息 也可能是同一基因转录好几种不同的mRNA的
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2楼2012-12-23 19:17:08
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sls19881024

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ccharlien at 2012-12-23 19:17:08
相差的碱基是在什么位置？
模板是什么？
你看看你的基因信息 也可能是同一基因转录好几种不同的mRNA的

模板是cDNA    相差的碱基比较分散
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小松
3楼2012-12-24 11:07:23
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sls19881024

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ccharlien at 2012-12-23 19:17:08
相差的碱基是在什么位置？
模板是什么？
你看看你的基因信息 也可能是同一基因转录好几种不同的mRNA的

“也可能是同一基因转录好几种不同的mRNA的”这是什么意思啊？不太懂哎
能说清楚点不?
赞一下 回复此楼
小松
4楼2012-12-24 11:12:54
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匿名

用户注销 (正式写手)
★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-12-24 19:09:12
本帖仅楼主可见
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5楼2012-12-24 11:34:53
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

ccharlien

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

你BLAST看看这对引物是不是会扩出家族的其他成员
以及这个基因的不同mRNA异构体
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2012-12-24 16:21:54
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